Агар со спиртовым голубым HiMedia M445-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Агар со спиртовым голубым HiMedia M445-500G (уп/500 г) для определения и подсчета липолитических микроорганизмов. Применяется для анализа клинических и молочных проб; содержит индикатор спиртовой голубой для визуализации липолиза.

Принцип измерения

Среда основана на способности липолитических микроорганизмов вырабатывать фермент липазу, который расщепляет липиды (жиры и масла). В процессе катаболизма липидов высвобождаются свободные жирные кислоты. Спиртовой голубой используется в качестве инертного индикатора липолиза: при расщеплении липидного субстрата вокруг колоний образуются прозрачные ореолы (зоны просветления) или зоны глубокого синего цвета.

Триптон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и минералов.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды:

   • Суспендируйте 32,15 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
   • Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
   • Охладите среду до 45–50 °C.
   • При перемешивании медленно добавьте 30 мл липазного субстрата для равномерного распределения.
   • Разлейте среду в стерильные чашки Петри. Примечание: Для обеспечения надлежащей активности липазы рекомендуется использовать стеклянные чашки вместо одноразовых пластиковых.

2. Подготовка субстрата (при необходимости): Для создания эмульсии растворите 10 г акации или 1 мл полисорбата 80 в 400 мл теплой дистиллированной воды, добавьте 100 мл хлопкового или оливкового масла и интенсивно перемешайте.

3. Посев и инкубация:

   • Подготовьте разведение исследуемого продукта (например, 1:10).
   • Нанесите 0,1 мл соответствующего разведения на поверхность среды методом посева.
   • Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 24–48 часов.

4. Интерпретация результатов: Колонии липолитических организмов характеризуются образованием прозрачной зоны и/или глубокого синего окрашивания вокруг и под каждой колонией.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,7% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: базовый гель синего цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего; после добавления липазного субстрата образуется лавандовый слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов с добавлением липазного субстрата.

* — соответствующие номера WDCM.

Область применения

Среда предназначена для выделения и количественного учета липолитических микроорганизмов из:

• клинических образцов;
• проб пищевых продуктов и молочной продукции (где рост липазопродуцирующих микроорганизмов может привести к дефектам вкуса и появлению прогорклости).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и меры предосторожности

• Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Только для профессионального использования. При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Тип питательной среды: Диагностический.