HiMedia M440-500G Пептонно-железный агар

Питательная микробиологическая среда HiMedia M440-500G Пептонно-железный агар — сухая порошкообразная среда для выявления продукции H₂S. Применяется для идентификации бактерий по образованию сероводорода; фасовка составляет 500 г, конечный pH среды — 6,7 ± 0,2.

Назначение

Пептонно-железный агар используют для обнаружения продукции сероводорода (H₂S) микроорганизмами при их идентификации. Среда является модификацией исходной формулы Левина.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Принцип обнаружения H₂S

Способность отдельных видов бактерий высвобождать серу из серосодержащих аминокислот или других соединений в форме сероводорода является важным признаком при их идентификации.

Для выявления H₂S в среду вводят источник серы и индикаторную систему. Тиосульфат натрия служит дополнительным неорганическим источником серы, а цитрат аммония и железа — индикатором H₂S.

Пептический перевар животной ткани и протеозный пептон обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, включая микроэлементы. Под действием бактериальных ферментов из тиосульфата высвобождается сульфид. Сульфид соединяется с ионами водорода с образованием H₂S, после чего реагирует с ионами железа, поступающими из цитрата аммония и железа. В результате образуются нерастворимые сульфиды тяжёлых металлов, проявляющиеся в виде чёрного осадка.

Глицерофосфат натрия выполняет функцию буфера среды.

По сравнению со свинцово-ацетатным агаром, также применяемым для выявления H₂S, пептонно-железный агар обеспечивает более чёткие и ранние результаты, поскольку цитрат аммония и железа является более эффективным индикатором сероводорода, чем ацетат свинца.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,58 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов, приблизительно 0,103 МПа (1,03 бар), и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках в вертикальном положении либо в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенной поверхности образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,66 % при 25 °C.
• pH: 6,7 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.