Основа гоноккокового агара HiMedia M434-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Основа гоноккокового агара HiMedia M434-500G (уп/500 гр) для селективного выделения и культивирования гонококков. Применяется в качестве базы для приготовления специализированных сред с добавлением крови, гемоглобина или антибиотиков; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения

Среда предназначена для роста требовательных микроорганизмов, в частности Neisseria gonorrhoeae. Специальный пептон обеспечивает необходимые питательные вещества, а крахмал нейтрализует токсичные метаболиты, вырабатываемые нейссериями. Фосфаты поддерживают стабильный уровень pH, предотвращая его изменение при производстве аминов. Для роста видов Haemophilus необходим фактор X (гемин), который обеспечивается добавлением гемоглобина. Дополнительные добавки обеспечивают фактор V (НАД — никотинамидадениндинуклеотид), аминокислоты, коферменты и ионы железа, что стимулирует рост патогенных нейссерий.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления

Приготовление базовой среды двойной концентрации

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Отдельно суспендируйте 10 г ростовой добавки FO (FD022) в 500 мл очищенной или дистиллированной воды (2 % раствор) до получения однородной смеси.
4. Стерилизуйте оба раствора в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Равномерно смешайте оба раствора и в асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов селективной добавки GC (FD021).
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Приготовление шоколадного кровяного агара (Chocolate Blood Agar)

1. Приготовьте среду одинарной концентрации, используя 3,6 г порошка на 100 мл дистиллированной воды.
2. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
3. Добавьте 5 % (об/об) дефибринированной крови.
4. Тщательно перемешайте и прогрейте при 80 °C в течение 10 минут.

Повышение селективности и питательных свойств

Для увеличения селективности среды можно добавить следующие антибиотические добавки (по два флакона на литр):

• V.C.N. Supplement (FD023);
• V.C.N.T. Supplement (FD024);
• Linco T Supplement (FD026);
• Vanclo T Supplement (FD028).

Для улучшения питательных свойств можно добавить (по два флакона на литр):

• Vitamino Growth Supplement (FD025);
• Yeast Autolysate Supplement (FD027).

Область применения и работа с образцами

Среда используется для анализа клинических образцов: мочи и респираторных экссудатов.

Правила сбора и посева

• Избегайте использования ватных тампонов при сборе образцов.
• Посев следует проводить незамедлительно после сбора материала.
• Образцы наносят на поверхность чашек штрихом так, чтобы в одних зонах была высокая плотность посева, а в других — низкая.

Условия инкубации

Инкубация проводится при температуре 37 °C в атмосфере с влажностью 70 % и содержанием углекислого газа (CO₂) 5–10 %. Все предполагаемые культуры Neisseria должны быть подтверждены тестами на ферментацию углеводов и серологическими тестами.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления 2 % гемоглобина — шоколадно-коричневый непрозрачный гель.
• Реакция (pH 3,6 % водного раствора при 25 °C): 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в присутствии 5–10 % CO₂ и влажности 70 % с добавлением стерильной ростовой добавки FO (FD022) и селективной добавки GC (FD021) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Ограничения и предостережения

1. Для роста требовательных организмов (Haemophilus и гонококков) обязательно добавление гемоглобина или витаминных ростовых добавок.
2. Различные штаммы могут демонстрировать разные паттерны роста на данной среде.
3. Рекомендуется проводить биохимическую характеристику чистых культур для окончательной идентификации.
4. Только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре от +2 до +8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Совместимые добавки

По заявке поставляются:

• FD021 GC Supplement (w/Antibiotics) / Селективная добавка с антибиотиками для основы гонококкового агара
• FD022 Hemoglobine Powder, Soluble / Гемоглобин сухой, растворимый
• FD023 V.C.N. Supplement / Селективная добавка с антибиотиками
• FD024 V.C.N.T. Supplement / Селективная добавка с антибиотиками
• FD025 Vitamino Growth Supplement / Витаминная ростовая добавка
• FD026 Linco T Supplement / Селективная добавка с антибиотиками
• FD027 Yeast Autolysate Supplement / Добавка на основе дрожжевого автолизата
• FD028 Vanclo T Supplement / Селективная добавка с антибиотиками