Основа глюкозо-цистеинового агара с тиамином HiMedia M433-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды HiMedia M433-500G (уп/500 гр) — порошкообразная агаровая среда с тиамином для приготовления селективной среды при добавлении крови, гемоглобина или гемина. Основа предназначена для культивирования и подсчёта Francisella tularensis в микробиологических лабораториях; работа с подозрительными образцами требует соблюдения процедур биологической безопасности уровня BSL-2.

Назначение

При добавлении крови, гемоглобина или гемина используется для культивирования и подсчёта Francisella tularensis.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Пептон HM эквивалентен мясному пептону.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/дюйм², что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильные концентрированные эритроциты до конечной концентрации 2 % либо 4–5 % дефибринированной крови овцы или кролика.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Francisella tularensis — грамотрицательная аэробная палочка, возбудитель туляремии. Туляремия преимущественно поражает диких животных и поддерживается в природе эктопаразитами, загрязнённой окружающей средой, каннибализмом и острыми или хроническими носителями. Кусающие и кровососущие насекомые служат переносчиками инфекции.

Бактерии рода Francisella, ранее относимые к роду Pasteurella, не культивируются на обычных питательных средах и требуют сложной среды, содержащей кровь или тканевые экстракты, тиамин и цистеин. Основа глюкозо-цистеинового агара с тиамином после добавления крови или гемоглобина рекомендуется для культивирования и подсчёта F. tularensis, также известной как Pasteurella tularensis.

Функции компонентов среды:

• пептон HM и соевый пептон обеспечивают необходимые питательные вещества для роста;
• декстроза служит легко метаболизируемым источником углеводов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• тиамин и гидрохлорид цистеина способствуют росту и необходимы для культивирования Pasteurella.

Через 48 ч формируются мелкие колонии каплевидной формы.

Типы образцов

• Клинические образцы:
  • мазки или соскобы с кожных поражений;
  • мазки из глотки;
  • образцы мокроты;
  • желудочные аспираты — в зависимости от формы заболевания.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

F. tularensis обладает высокой вирулентностью. Лабораторное заражение возможно через аэрозоли или капли, поэтому с клиническими образцами необходимо обращаться с особой осторожностью.

Образцы, предположительно содержащие F. tularensis, следует обрабатывать в соответствии с процедурами биологической безопасности уровня BSL-2.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: образует гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления 4–5 % стерильной дефибринированной крови овцы или кролика: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция: для водного раствора с концентрацией 5,8 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации с добавлением 4–5 % дефибринированной крови овцы при 35–37 °C в течение 48–72 ч в присутствии 10 % CO₂.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой основы: 10–30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M433-500G
• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Итоговый pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Реакция водного раствора: 5,8 % масс./об. при 25 °C
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время автоклавирования: 15 мин
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов/дюйм², примерно 0,103 МПа
• Температура охлаждения перед добавлением крови: 45–50 °C
• Концентрация стерильных эритроцитов: 2 %
• Концентрация дефибринированной крови овцы или кролика: 4–5 %
• Условия оценки культуральных характеристик: 35–37 °C, 48–72 ч, 10 % CO₂