HiMedia M433-100G Основа агара с глюкозой и цистеином с тиамином

Основа агара с глюкозой и цистеином с тиамином HiMedia M433-100G — сухая питательная среда для культивирования и подсчета Francisella tularensis. При добавлении крови, гемоглобина или гемина используется для выделения возбудителя туляремии; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Francisella tularensis (грамотрицательная аэробная бацилла) является этиологическим агентом туляремии. Данный микроорганизм не растет на обычных питательных средах и требует комплексного состава, содержащего кровь или экстракты тканей, тиамин и цистеин.

В составе среды:

• Пептон HM и соевый пептон: обеспечивают основные питательные вещества для роста.
• Декстроза (глюкоза): служит легкометаболизируемым источником углеводов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Тиамин и гидрохлорид L-цистеина: выступают в роли факторов роста, необходимых для культивирования Pasteurella (ранее Francisella).

При использовании среды с добавлением крови через 48 часов развиваются мелкие каплевидные колонии.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,9 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте стерильные упакованные эритроциты до конечной концентрации 2 % или 4–5 % дефибринированной крови овцы/кролика.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: мазки или соскобы с кожных поражений, мазки из зева, образцы мокроты или аспираты из желудка (в зависимости от формы заболевания).
• Пробы воды.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,4 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: янтарный цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • С добавлением 4–5 % крови: вишнёво-красный непрозрачный гель.
• Реакция (pH 5,8 % водного раствора при 25 °C): 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 4–5 % дефибринированной крови овцы после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов в присутствии 10 % $\text{CO}_2$.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для профессионального использования в лабораторной диагностике in vitro.

Ограничения и меры предосторожности:

• F. tularensis обладает высокой вирулентностью. Лабораторные инфекции могут быть приобретены через аэрозоли или капли.
• Работа с клиническими образцами и подозреваемыми культурами должна проводиться с крайней осторожностью в соответствии с протоколами уровня биологической безопасности 2 (BSL-2).
• Требуется использование средств индивидуальной защиты: перчаток, защитной одежды, защиты глаз и лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательному обеззараживанию путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по утилизации инфекционных материалов.