HiMedia M433-100G Основа агара с глюкозой и цистеином с тиамином

Основа питательной среды HiMedia M433-100G Основа агара с глюкозой и цистеином с тиамином — сухая порошкообразная среда массой 100 г для микробиологических исследований. Используется после добавления крови, гемоглобина или гема для культивирования и количественного определения Francisella tularensis; конечный pH среды составляет 6,9 ± 0,2.

Назначение

Основа агара с глюкозой и цистеином с тиамином применяется с добавлением крови, гемоглобина или гема для культивирования и количественного определения Francisella tularensis.

Состав

Состав рассчитан на приготовление 1 л среды:

* Пептон HM эквивалентен мясному пептону. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Francisella tularensis — грамотрицательная аэробная палочка, возбудитель туляремии. Туляремия преимущественно поражает диких животных и поддерживается в природе эктопаразитами, загрязнённой окружающей средой, каннибализмом, а также острыми и хроническими носителями. Кусающие и кровососущие насекомые служат переносчиками инфекции.

Francisella (ранее известная как Pasteurella) не культивируется на обычных питательных средах и требует сложной среды, содержащей кровь или тканевые экстракты, тиамин и цистеин. Основа агара с глюкозой, цистеином и тиамином после добавления крови или гемоглобина предназначена для культивирования и количественного определения F. tularensis (прежнее название — Pasteurella tularensis).

• Пептон HM и соевый пептон обеспечивают необходимые питательные вещества для роста.
• Декстроза служит легко метаболизируемым источником углеводов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Тиамин и гидрохлорид цистеина действуют как факторы, стимулирующие рост, необходимые для культивирования Pasteurella.
• Мелкие колонии, напоминающие капли, развиваются через 48 ч.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Ориентировочное избыточное давление составляет ≈0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильные упакованные эритроциты до конечной концентрации 2 % либо 4–5 % дефибринированной крови овцы или кролика.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Допустимые типы образцов:

• клинические образцы — мазки или соскобы с кожных поражений;
• мазки из глотки;
• образцы мокроты;
• желудочные аспираты — в зависимости от формы заболевания;
• образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения и биологическая безопасность

F. tularensis отличается высокой вирулентностью. Лабораторное заражение возможно через аэрозоли или капли, поэтому клинические образцы необходимо обрабатывать с особой осторожностью.

Образцы, предположительно содержащие F. tularensis, следует обрабатывать в соответствии с процедурами уровня биологической безопасности 2 (BSL-2).

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирующая способность

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: образует гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления 4–5 % стерильной дефибринированной крови овцы или кролика: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 4–5 % дефибринированной крови овцы, инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч в присутствии 10 % CO₂.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.