HiMedia M417-100G Агар для витамина B12

Сухая питательная среда HiMedia M417-100G Агар для витамина B12 для микробиологического анализа содержания витамина B12. Применяется с использованием тест-штамма Lactobacillus leichmannii ATCC 4797 методом чашек с лунками или дисками.

Принцип измерения

Агар для витамина B12 представляет собой сухую среду, которая не содержит витамина B12, но включает все питательные вещества, необходимые для роста Lactobacillus leichmannii ATCC 4797. При добавлении витамина B12 в заданных возрастающих количествах наблюдается рост микроорганизма, который измеряется по диаметру зоны роста вокруг диска или лунки, содержащей витамин. Результаты анализа оцениваются турбидиметрически или ацидометрически.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Для анализа рекомендуется использовать свежепересеянные организмы, инкубированные при 37 °C в течение 24 часов. Подготовку осуществляют путем пересева из стоковой культуры, созданной методом укольного посева; затем клетки центрифугируют, промывают и суспендируют в 10 мл физиологического раствора.

Процедура анализа

1. Подготовьте стандартную кривую, где абсорбция является функцией концентрации витамина B12.
2. Внесите исследуемый образец в лунки или на диски.
3. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 18–24 часов.
4. Измерьте диаметр зоны роста.
5. Рассчитайте концентрацию витамина B12 в исследуемом образце путем интерполяции данных по стандартной кривой.

Требования к подготовке

Необходимо строго избегать загрязнения сред или стеклянной посуды. Используйте чистую посуду, очищенную от моющих средств. Даже незначительное загрязнение посторонними веществами может привести к ошибочным результатам. Тест-организм должен культивироваться и храниться на рекомендованных для этой цели средах.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 88,62 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,2 ± 0,2
• Внешний вид: однородный порошок от белого до желтоватого цвета, склонный к образованию мягких комков, которые легко дробятся.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Дополнительные параметры

Область применения

Среда используется для количественного микробиологического определения содержания витамина B12 в препаратах и образцах. Состав среды соответствует требованиям Фармакопеи США (USP) и методам AOAC.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C (рекомендуется использовать эксикатор).
• Срок годности: указан на этикетке.
• Особенности: использовать свежеприготовленную среду.