Основа среды Тайера-Мартина HiMedia M413-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Основа среды Тайера-Мартина HiMedia M413-500G (уп/500 гр) — порошковая основа массой 500 г для приготовления селективной среды. Применяется для селективного выделения гонококков из патологического материала с добавлением гемолизированной крови и ростовых или антибиотических добавок; среда может ингибировать некоторые виды Haemophilus.

Назначение и область применения

Основа среды Тайера-Мартина используется для приготовления селективной среды первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из образцов со смешанной микрофлорой.

Тип питательной среды: диагностический.
Назначение изделия: основа.
Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Типы исследуемых образцов

Клинические образцы:

• мазки из горла;
• вагинальные выделения;
• образцы из прямой кишки;
• образцы из уретры.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Конечный показатель pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Усовершенствованная среда для выделения гонококков в течение 24 ч была описана Carpenter и Morton. Позднее была продемонстрирована эффективность среды GC с добавлением гемоглобина и дрожжевого концентрата для выделения гонококков.

Среда Тайера—Мартина разработана для первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из образцов, содержащих смешанную микрофлору, полученных из горла, влагалища, прямой кишки и уретры. В исходной рецептуре Тайера и Мартина использовались ванкомицин, колистин и нистатин. Martin и Lester добавили триметоприм для повышения селективности среды.

Функции компонентов и добавок:

• специальный пептон обеспечивает микроорганизмы питательными веществами;
• крахмал нейтрализует токсичные жирные кислоты, если они присутствуют в агаре;
• гемоглобин обеспечивает фактор X;
• фактор V — НАД (никотинамидадениндинуклеотид) — поступает с добавляемой ростовой добавкой;
• витаминная ростовая добавка FD025 содержит витамины, аминокислоты, коферменты и другие компоненты, усиливающие рост патогенных нейссерий;
• ванкомицин и колистин подавляют соответственно грамположительные и грамотрицательные бактерии;
• нистатин подавляет рост грибов.

Среда может ингибировать виды Haemophilus. Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на этой среде при посеве образцов из ротоглотки.

Приготовление среды

Базовый вариант с гемолизированной кровью

1. Суспендируйте 21,0 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной гемолизированной крови.
6. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона витаминной ростовой добавки FD025 и одну из селективных добавок:
   • V.C.N. Supplement FD023;
   • V.C.N.T. Supplement FD024.
7. При необходимости вместо отдельных добавок FD023 или FD024 можно использовать одну селективную добавку GC Supplement with Antibiotics FD021.
8. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Вариант с гемоглобином

1. Суспендируйте 21,0 г основы среды Тайера—Мартина в 250 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Приготовьте 250 мл 2%-ного раствора гемоглобина.
4. Отдельно стерилизуйте раствор гемоглобина автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите основу среды и раствор гемоглобина до 45–50 °C.
6. Смешайте основу среды с раствором гемоглобина.
7. Добавьте добавки в соответствии с процедурой для базового варианта:
   • витаминную ростовую добавку FD025;
   • V.C.N. Supplement FD023 или V.C.N.T. Supplement FD024;
   • при необходимости — GC Supplement with Antibiotics FD021 вместо отдельных селективных добавок.
8. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением стерильной гемолизированной крови FD022, витаминной ростовой добавки FD025 и V.C.N. Supplement FD023 или V.C.N.T. Supplement FD024.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

После добавления гемоглобина или стерильной гемолизированной крови и селективных добавок: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадного цвета.

Реакция

Реакция 4,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,80–7,20.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Из-за вариаций питательных свойств и требовательности микроорганизмов некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на среде при посеве образцов из ротоглотки.
• Для подтверждения результата необходима последующая биохимическая идентификация.

Требования безопасности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.

Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.

Дополнительные требования:

• используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке;
• после вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе;
• плотно закрывайте флакон после каждого использования для предотвращения образования комков из-за