HiMedia M413-100G Основа среды Тайера-Мартина

Питательная среда HiMedia M413-100G «Основа среды Тайера—Мартина» производства HiMedia — порошковая основа для селективного выделения гонококков из патологического материала. Основа применяется для профессионального микробиологического анализа клинических образцов из зева, влагалища, прямой кишки и уретры; хранение продукта требуется при 10–30 °C.

Назначение

Основа среды Тайера—Мартина рекомендована для селективного выделения Neisseria gonorrhoeae из патологических образцов. Среда также предназначена для первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из материала со смешанной микрофлорой, полученного из зева, влагалища, прямой кишки и уретры.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Усовершенствованная среда для выделения гонококков в течение 24 ч была описана Carpenter и Morton. Позднее была продемонстрирована эффективность GC-среды, дополненной гемоглобином и концентратом дрожжевого экстракта, для выделения гонококков.

Среда Тайера—Мартина разработана для первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из образцов, содержащих смешанную микрофлору, полученных из зева, влагалища, прямой кишки и уретры. Для придания селективности в составе применяются ванкомицин, колистин и нистатин; позднее Martin и Lester дополнили состав антибиотиком триметопримом.

Функции компонентов и добавок:

• Специальный пептон обеспечивает микроорганизмы питательными веществами.
• Крахмал нейтрализует токсичные жирные кислоты, если они присутствуют в агаре.
• Гемоглобин обеспечивает фактор X.
• Фактор V — НАД (NAD) — поступает с добавляемой питательной добавкой.
• Витаминная питательная добавка FD025 содержит витамины, аминокислоты, коферменты и другие компоненты, усиливающие рост патогенных нейссерий.
• Ванкомицин подавляет грамположительные бактерии.
• Колистин подавляет грамотрицательные бактерии.
• Нистатин подавляет грибы.

Среда может подавлять рост видов Haemophilus. Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на этой среде при посеве образцов из ротоглотки.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 21,0 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной лизированной крови, регидратированное содержимое одного флакона витаминной питательной добавки FD025 и добавку V.C.N. FD023 либо V.C.N.T. FD024.
6. При необходимости вместо указанных компонентов можно использовать GC-добавку с антибиотиками FD021 в качестве единой добавки.
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Вариант приготовления с гемоглобином

1. Суспендируйте 21,0 г основы среды Тайера—Мартина в 250 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Приготовьте 250 мл 2%-ного раствора гемоглобина.
4. Стерилизуйте раствор гемоглобина отдельно автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите раствор гемоглобина и растворённую основу до 45–50 °C.
6. Смешайте оба компонента.
7. Добавьте питательные и селективные добавки в соответствии с описанной выше процедурой.

Типы образцов

Клинические образцы:

• материал из зева;
• влагалищные выделения;
• материал из прямой кишки;
• материал из уретры.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методики обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными рекомендациями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Из-за питательных различий и требовательности микроорганизмов некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на среде при внесении образцов из ротоглотки.
• Для подтверждения результата необходима дальнейшая биохимическая идентификация.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании до истечения срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления гемоглобина либо стерильной лизированной крови и питательных добавок: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадного цвета.

Реакция

Реакция 4,2%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением стерильной добавки для роста FO FD022, витаминной питательной добавки FD025 и добавки V.C.N. FD023 либо V.C.N.T. FD024.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения основы: 10–30 °C.
• Условия хранения основы: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия продукт необходимо хранить в сухом виде в плотно закрытой бутылке, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• pH готовой среды при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 6,80–7,20
• Упаковка: контейнер из ПЭВП.

Техническое отличие от базовых питательных сред

В отличие от неспецифических питательных сред, основа Тайера—Мартина используется с гемоглобином или лизированной кровью и селективными добавками FD021, FD023, FD024 или FD025 для выделения патогенных нейссерий из образцов со смешанной микрофлорой.