Основа декарбоксилазного бульона HiMedia M393-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Основа декарбоксилазного бульона HiMedia M393-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Применяется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-аминокислоты, добавляемые в среду.

Принцип измерения

Основа декарбоксилазного бульона по Мюллеру используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основе их способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда позволяет определить продукцию декарбоксилазы лизина и орнитина, а также дигидролазы аргинина.

В состав входят пептон и HM пептон B, обеспечивающие азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Декстроза служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы. В качестве индикаторов pH используются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный.

Интерпретация результатов:

1. При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, pH снижается из-за образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на жёлтый.
2. Образовавшаяся кислота стимулирует работу фермента декарбоксилазы.
3. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина, орнитина — путресцина. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.
4. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из жёлтого в пурпурный.
5. Если микроорганизмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остаётся кислой (жёлтый цвет).

Для каждого тестируемого изолята необходимо использовать контрольную пробирку с основой бульона без добавления аминокислоты.

Методика приготовления и анализа

1. Растворите 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или других L-аминокислот. При использовании DL-аминокислот концентрация должна составлять 2 %.
3. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
4. При добавлении L-орнитина требуется повторная корректировка pH.
5. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
6. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.
7. После инокуляции пробирки необходимо защитить от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности, что сделает тест недостоверным.

Область применения

Среда рекомендована для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы (кровь);
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции;
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические показатели

• Конечный pH (при 25 °C): 6,0 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 5,80–6,20
• Внешний вид: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Ограничения и предостережения

• Некоторые требовательные (fastidious) микроорганизмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
• Наличие слоя минерального масла является обязательным условием для получения достоверных результатов.
• Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.