Основа декарбоксилазного бульона HiMedia M393-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда «Основа декарбоксилазного бульона HiMedia M393-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia предназначена для выявления декарбоксилазной активности бактерий. Среда используется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-аминокислоты; для корректного результата необходимы добавление соответствующей аминокислоты и покрытие инокулированной среды стерильным минеральным маслом.

Назначение

Основа декарбоксилазного бульона по Мюллеру применяется для дифференциации бактерий клинического и внеклинического происхождения по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда используется для выявления лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдигидролазы, преимущественно у грамотрицательных кишечных палочек.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Форма выпуска: 500 г
Артикул: M393-500G

Состав

Содержание компонентов приведено для 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
5. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте pH.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа.

Принцип измерения и интерпретация

Основа декарбоксилазного бульона по Мюллеру используется для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать аминокислоты. Метод позволяет выявлять образование лизиндекарбоксилазы и орнитиндекарбоксилазы, а также аргининдигидролазы.

Продукция орнитиндекарбоксилазы служит критерием дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: представители Klebsiella неподвижны и не образуют орнитиндекарбоксилазу, тогда как представители Enterobacter подвижны и образуют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Пептон HM B и пептон обеспечивают бактерии азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

После инокуляции среды бактериями, ферментирующими декстрозу, pH снижается вследствие образования кислоты, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция стимулирует активность фермента декарбоксилазы. При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин, при декарбоксилировании орнитина — путресцин. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование аминов повышает pH среды, в результате чего цвет индикатора изменяется с жёлтого на пурпурный. Если микроорганизм не образует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтую окраску.

Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с основой декарбоксилазного бульона по Мюллеру без добавления аминокислоты. Инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать защелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным.

Образцы

Типы образцов:

• клинические образцы — кровь;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Сбор и обработка образцов

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Некоторые требовательные к условиям культивирования микроорганизмы могут давать замедленную реакцию.
2. Покрытие среды минеральным маслом необходимо для получения корректных результатов.

Условия проведения анализа

Культуральные характеристики: оцениваются после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и покрытием среды стерильным минеральным маслом.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка в пробирках.

Реакция: реакция 1,05 % водного раствора при 25 °C; pH 6,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,80–6,20.

* Соответствующие номера WDCM.
Klebsiella aerogenes ранее назывался Enterobacter aerogenes.
Proteus hauseri ранее назывался Proteus vulgaris.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикет