Дифференциальная питательная среда «Основа декарбоксилазного бульона HiMedia M393-100G (уп/100 гр)» производства HiMedia предназначена для биохимической дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Основа применяется для клинических и неклинических образцов, а приготовленная среда требует добавления L-аминокислот и защиты стерильным минеральным маслом от контакта с воздухом.

Назначение

Основа декарбоксилазного бульона по Мюллеру предназначена для дифференциации бактерий, включая грамотрицательные энтеробактерии, по способности декарбоксилировать добавленные аминокислоты. Среда применяется для выявления лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдигидролазы.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Форма выпуска: порошок
Масса упаковки: 100 г
Производитель: HiMedia
Происхождение: животное
Тип продукта: стандартный
Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г одной из аминокислот: L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
5. При добавлении L-орнитина выполните повторную корректировку pH.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 10 мин; указанное производителем давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует ориентировочно 0,103 МПа.

Принцип измерения и интерпретация

Среда используется для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек на основании способности декарбоксилировать аминокислоты. Метод декарбоксилазного бульона для выявления лизин- и орнитиндекарбоксилазы, а также аргининдигидролазы был предложен Мюллером.

Пептон HM B и пептон обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста бактерий. Декстроза является сбраживаемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

При посеве бактерий, сбраживающих декстрозу, pH снижается из-за образования кислоты, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция стимулирует активность фермента декарбоксилазы. При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин, а при декарбоксилировании орнитина — путресцин. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование аминов повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на пурпурный. Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтый цвет.

Каждый исследуемый изолят также следует инокулировать в пробирку с декарбоксилазным бульоном по Мюллеру без соответствующей аминокислоты.

Засеянные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать ощелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным.

Продукция орнитиндекарбоксилазы может использоваться как критерий дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: кровь.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

1. Некоторые требовательные к условиям культивирования микроорганизмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
2. Для получения корректных результатов обязательно покрывать среду слоем минерального масла.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,05 % масс./об. при 25 °C.

pH по техническим требованиям: 5,80–6,20.

pH водного раствора: 6,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и покрытием стерильным минеральным маслом.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при температуре 15–30 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать