Основа агара МакКлунга и Тоубе HiMedia M387-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа агара МакКлунга и Тоубе HiMedia M387-500G (уп/500 гр)» — диагностическая основа для выявления и выделения Clostridium perfringens из пищевых продуктов с конечным pH 7,6 ± 0,2. Среда применяется для микробиологического контроля пищевых образцов и дифференциации видов Clostridium по лецитиназной и липазной активности.

Назначение

Основа агара МакКлунга и Тоубе предназначена для выявления и выделения Clostridium perfringens из образцов пищевых продуктов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 75,1 г порошка в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 20 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов/дюйм², ориентировочно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Пищевое отравление, вызываемое Clostridium perfringens, относится к распространённым видам пищевых токсикоинфекций. Обычно заболевание связано с готовыми мясными продуктами или продуктами из птицы, содержащими большое количество жизнеспособных клеток.

Основные симптомы диареи при отравлении, вызванном C. perfringens, обусловлены термолабильным энтеротоксином, который продуцируется только спорулирующими клетками. Энтеротоксин не образуется предварительно в пищевом продукте, однако продукты, в которых складываются благоприятные условия для спорообразования, могут содержать энтеротоксин. Поэтому количественное определение этих микроорганизмов в пищевых продуктах имеет значение при расследовании случаев пищевых заболеваний.

Среда МакКлунга и Тоубе разработана для выделения и дифференциации видов Clostridium из пищевых продуктов по лецитиназной и липазной активности.

При добавлении 50 % эмульсии яичного желтка C. perfringens и некоторые другие виды Clostridium проявляют лецитиназную реакцию. Фермент лецитиназа расщепляет лецитин яичного желтка, в результате чего вокруг слегка приподнятых колоний образуется непрозрачная зона преципитации.

Функции компонентов среды:

• Протеозопептон обеспечивает микроорганизмы азотистыми питательными веществами.
• Декстроза является ферментируемым углеводом.
• Фосфаты образуют буферную систему.
• Хлорид натрия обеспечивает необходимые ионы.
• Сульфат магния обеспечивает двухвалентные катионы и сульфат-ионы.

Методика исследования пищевых образцов

1. Внесите по 25 г исследуемого пищевого образца в две пробирки, содержащие по 25 мл жидкой тиогликолевой среды M009 и перевёрнутую трубку Дюргама.
2. Инкубируйте при 46 °C в течение 4–6 ч.
3. Оцените наличие роста и газообразования.
4. Пересевайте предполагаемые культуры C. perfringens штриховым способом на чашки с агаром МакКлунга и Тоубе.
5. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, полученным из 2,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Реакция и pH

• Реакция: для 7,5 % мас./об. водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч в анаэробных условиях с добавлением стерильной эмульсии яичного желтка FD045.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: основа
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Реагенты и совместимые компоненты

• Стерильная эмульсия яичного желтка FD045 — добавляется в объёме 100 мл к среде, приготовленной из 75,1 г порошка в 900 мл дистиллированной воды.
• Жидкая тиогликолевая среда M009 — используется для предварительного обогащения пищевых образцов.