Основа агара МакБрайда для листерий HiMedia M386-500G (уп/500 гр)

Элективная основа агара МакБрайда для листерий HiMedia M386-500G (уп/500 г) предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes. Среда применяется для анализа клинического материала и пищевых продуктов, включая сырое молоко; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана для выявления низких концентраций L. monocytogenes в образцах. Триптоза и пептон HM B обеспечивают азот, углерод, серу и микроэлементы, необходимые для роста листерий. Фенилэтиловый спирт оказывает бактериостатическое действие на грамотрицательные бактерии, селективно ингибируя синтез ДНК. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а глицин подавляет рост ряда грамотрицательных и грамположительных бактерий, включая Escherichia coli и Enterococcus faecalis. Дополнительная селективность достигается путем добавления селективной добавки МакБрайда (FD070).

Предположительные колонии Listeria отбирают при транслюмиминации под углом 45°. Колонии листерий плотные, от белого до опалесцирующего белого цвета, напоминают «дроблёное стекло». Мелкие колонии могут иметь синеватый оттенок, в то время как нелистерии обычно образуют желтовато-оранжевые колонии.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и предварительное обогащение

Для повышения эффективности обнаружения L. monocytogenes рекомендуется предварительное обогащение в жидких средах:

1. Одноэтапный метод: инокуляция материала непосредственно в основу селективного бульона для листерий (M889).
2. Двухэтапный метод: инокуляция в основу обогатительного бульона для листерий (UVM) (M890A) с инкубацией при температуре холодильника (+4 °C) в течение нескольких недель (холодное обогащение), за чем следует пересев в основу вторичного обогатительного бульона Фрейзера (M1083) и последующий посев на селективный агар МакБрайда.

Приготовление среды

1. Растворить 46,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. До начала желирования асептически добавить стерильную дефибринированную кровь до конечной концентрации 5 % (об/об) и содержимое одного флакона регидратированной селективной добавки МакБрайда (FD070).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или очень слабо опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнёво-красный непрозрачный гель.
• Реакция 4,6 % водного раствора (при 25 °C): pH 7,3 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены в анаэробной атмосфере с добавлением селективной добавки МакБрайда (FD070) и 5 % стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и работа с образцами

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: ткани организма, биологические жидкости, вагинальные мазки.
• Молочные продукты и сырье.

При сборе и обработке образцов следует руководствоваться установленными стандартами и протоколами. После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, необходимо плотно закрывать флакон во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

• Среда предназначена только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Различные штаммы микроорганизмов могут демонстрировать разный характер роста на данной среде.
• Для окончательной идентификации изолированных микроорганизмов требуются дополнительные биохимические тесты.
• При работе с образцами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица) и соблюдать правила микробиологической безопасности.