Основа агара МакБрайда для листерий HiMedia M386-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа агара МакБрайда для листерий HiMedia M386-500G (уп/500 гр)» — порошковая селективная среда с конечным pH 7,3 ± 0,2. Применяется для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических и пищевых образцов, включая молочные продукты; для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Основа агара МакБрайда для листерий предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и клинических образцов.

Среда применяется для выявления небольшого количества L. monocytogenes в пищевых образцах. Агар МакБрайда может использоваться как среда для высева с добавлением крови или без неё.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Эквивалент мясного экстракта.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• pH: 7,10–7,50
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Производитель: HiMedia

Приготовление среды

1. Взвесьте 46,0 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. До начала гелеобразования в асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную кровь до конечной концентрации 5 % об./об.
6. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки МакБрайда FD070.
7. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Листериоз часто вызывает аборты у крупного рогатого скота и овец. У человека заболевание может проявляться септицемией, энцефалитом и циркуляторным моноцитозом.

Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 до 45 °C — и при pH от 5,0 до 9,6. Микроорганизм также выживает в пищевых продуктах со значениями pH за пределами указанного диапазона. Благодаря этим свойствам Listeria может сохраняться после различных методов обработки пищевых продуктов.

Агар МакБрайда для листерий, рекомендованный Американской ассоциацией общественного здравоохранения, применяется для выделения Listeria из клинических образцов и пищевых продуктов, включая сырое молоко.

• Триптоза и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы азотом, углеродом, серой и необходимыми микроэлементами.
• Фенилэтиловый спирт оказывает бактериостатическое действие на грамотрицательные бактерии, избирательно ингибируя синтез ДНК.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Глицин подавляет ряд грамотрицательных и грамположительных бактерий, включая Escherichia coli и Enterococcus faecalis, которые относятся к распространённым сопутствующим загрязняющим микроорганизмам.
• Хлорид лития также обладает антибактериальной активностью.
• Дополнительная селективность достигается добавлением селективной добавки МакБрайда FD070.

Выявление L. monocytogenes значительно улучшается при предварительном обогащении в жидких средах одноэтапным или двухэтапным методом.

При одноэтапном методе инфицированный материал непосредственно инокулируют в основу селективного бульона для листерий M889.

При двухэтапном методе инфицированный материал инокулируют в основу бульона для обогащения листерий (UVM) M890A и инкубируют при температуре 4 °C в течение нескольких недель методом холодового обогащения. Такой режим применяется благодаря способности микроорганизма расти при низкой температуре. Затем материал инокулируют в основу вторичного обогатительного бульона Фрейзера M1083, после чего выполняют высев на селективный агар, например агар МакБрайда для листерий.

Предположительные колонии Listeria отбирают при трансиллюминации под углом 45°. Колонии Listeria имеют плотную белую или переливчато-белую окраску и напоминают измельчённое стекло. Небольшие колонии могут иметь синюю окраску. Нелистерийные микроорганизмы образуют желтовато-оранжевые колонии, которые подвергают дальнейшей очистке.

Типы образцов

• Клинические образцы:
  • ткани организма;
  • биологические жидкости;
  • вагинальные мазки.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным методическим рекомендациям.

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или от прозрачного до слегка опалесцирующего гель светло-янтарного цвета.
• После добавления стерильной крови в концентрации 5 % об./об.: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 4,6 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробной атмосфере с добавлением селективной добавки МакБрайда FD070 и 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различные типы роста на этой среде.
2. Каждая серия среды протестирована с микроорганизмами, указанными в сертификате анализа. При использовании среды для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований пользователя.
3. Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством