HiMedia M377-100G Лизин-железный агар

Дифференциальная питательная среда HiMedia M377-100G Лизин-железный агар для идентификации энтерических организмов, в частности Salmonella Arizonae. Применяется для определения способности микроорганизмов декарбоксилировать или дезаминировать лизин, а также образовывать сероводород (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Лизин-железный агар разработан для обнаружения лактозоположительных видов Salmonella. Данные микроорганизмы способны быстро декарбоксилировать лизин и вырабатывать значительное количество сероводорода. Среда является чувствительным инструментом для выявления как лактозоположительных, так и лактозоотрицательных видов Salmonella. Многие штаммы этой группы быстро ферментируют лактозу, что может подавлять продукцию H₂S на трёхуглеродном железном агаре (TSI), из-за чего возбудители пищевых отравлений могут быть пропущены. Использование данной среды совместно с TSI позволяет более точно дифференцировать колиформные организмы (например, Escherichia coli) и виды Shigella. Состав среды соответствует стандартам FDA BAM и APHA.

Механизм реакций:

• Питательные вещества: пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают основные потребности микроорганизмов.
• Углевод: декстроза служит источником ферментируемого углевода.
• Индикаторы H₂S: цитрат железа-аммония и тиосульфат натрия служат индикаторами образования сероводорода. Культуры, продуцирующие H₂S, вызывают почернение среды вследствие образования сульфида железа.
• Декарбоксилирование лизина: приводит к щелочной реакции (фиолетовый цвет) с образованием амина кадаверина. Организмы, не декарбоксилирующие лизин, создают кислую среду в столбике (жёлтый цвет).
• Дезаминирование лизина: приводит к образованию альфа-кетокарбоновой кислоты, которая под воздействием кислорода реагирует с солью железа у поверхности среды, образуя красно-коричневое соединение.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 34,56 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса с глубоким столбиком.
5. Посев: среду инокулируют путем укола до основания столбика и посева штрихом по скосу.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,7 ± 0,2
• Внешний вид: светло-жёлтый или серовато-жёлтый гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара
• Цвет и прозрачность готовой среды: фиолетовый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 6,50–6,90

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами. При анализе пищевых и молочных проб следует руководствоваться соответствующими методиками сбора и обработки образцов согласно рекомендациям FDA BAM и APHA.

Ограничения:

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
• Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователям рекомендуется валидировать среду для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, исходя из своих уникальных требований.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте стандартные правила микробиологической лабораторной практики.

Утилизация: Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательной деконтаминации путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами.