HiMedia M377-100G Лизин-железный агар

Питательная микробиологическая среда HiMedia M377-100G Лизин-железный агар — сухой агаровый препарат массой 100 г для дифференциации кишечных микроорганизмов по декарбоксилированию или дезаминированию лизина и образованию H₂S. Среда применяется преимущественно для биохимической идентификации Salmonella, включая Salmonella Arizonae, а готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Лизин-железный агар предназначен для дифференциации кишечных микроорганизмов, особенно Salmonella Arizonae, по способности декарбоксилировать или дезаминировать лизин и образовывать сероводород H₂S.

Среда рекомендована для биохимического исследования Salmonella в пищевых образцах. Состав среды соответствует требованиям FDA BAM и APHA.

Тип образца: выделенные микроорганизмы.

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяют соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Состав

Состав рассчитан на 1 л очищенной или дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Взвесьте 34,56 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в наклонном положении, чтобы сформировать скошенную часть и глубокий столбик среды.

Принцип измерения и интерпретация

Лизин-железный агар разработан Эдвардсом и Файфом для выявления лактозоферментирующих Salmonella. Представители Salmonella быстро декарбоксилируют лизин и образуют значительное количество сероводорода H₂S.

Среда предназначена для выявления как лактозоферментирующих, так и лактозонеферментирующих видов Salmonella. Многие штаммы этой группы очень быстро ферментируют лактозу, что подавляет образование H₂S на трёхсахарном железном агаре (M021). Поэтому существует вероятность, что микроорганизмы, часто вызывающие вспышки пищевых отравлений, могут остаться невыявленными.

Для повышения дифференцирующей способности при исследовании пищевых образцов лизин-железный агар используют совместно с трёхсахарным железным агаром (M021). Такой подход позволяет лучше различать колиформные микроорганизмы, например Escherichia coli, и виды Shigella.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду необходимыми питательными веществами. Декстроза служит источником сбраживаемого углевода. Цитрат аммония железа и тиосульфат натрия используются для индикации образования H₂S.

Образование сероводорода вызывает почернение среды вследствие образования сульфида железа. Декарбоксилирование лизина приводит к щелочной реакции и появлению пурпурной окраски с образованием амина кадаверина. Микроорганизмы, не декарбоксилирующие лизин, вызывают кислую реакцию в столбике среды, сопровождающуюся жёлтой окраской.

Микроорганизмы, дезаминирующие лизин, образуют альфа-кетокарбоновую кислоту. Под воздействием кислорода у поверхности среды эта кислота реагирует с солью железа с образованием соединения красно-коричневого цвета.

Посев выполняют проколом до основания столбика среды с последующим штриховым посевом по скошенной поверхности.

Совместное применение лизин-железного агара и трёхсахарного железного агара (M021) является фактическим отличием от использования только трёхсахарного железного агара: два варианта среды обеспечивают более полное различение колиформных микроорганизмов и видов Salmonella при биохимическом исследовании.

Контроль качества

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ём