Питательная агаризованная среда Агар для выделения маннитпозитивных азотобактерий HiMedia M372-500G (уп/500 гр), производства HiMedia, представляет собой порошок в упаковке 500 г. По техническому описанию производителя среда предназначена для первичного выделения патогенных грибов, при этом применение стрептомицина ограничивает культивирование чувствительных к нему микроорганизмов.

Назначение и идентификация

В названии товара и описании каталога среда обозначена как агар для выделения маннитпозитивных азотобактерий. В техническом описании производителя продукт обозначен как основа агаровой среды Литтмана с жёлчью и предназначен для первичного выделения патогенных грибов, включая дерматофиты и сапрофитные грибы, из клинических образцов. Перед применением следует сопоставить назначение среды с маркировкой конкретной партии, сертификатом анализа и утверждённой методикой лаборатории.

• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: химически определённая среда
• Эквивалент: Oxgall

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Состав жёлчи эквивалентен Oxgall.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Основа агара Литтмана с жёлчью разработана Литтманом. Агар Литтмана с Oxgall применяется для первичного и селективного выделения патогенных кожных грибов — дерматофитов — и сапрофитных грибов из различных клинических образцов.

Среда обеспечивает выделение грибов даже при значительном загрязнении исследуемых образцов бактериальной флорой. Основа агара Литтмана с жёлчью также используется для количественного определения численности грибов в воздухе, почве, пищевых продуктах и других материалах санитарного значения.

Кристаллический фиолетовый и стрептомицин оказывают ингибирующее действие на большинство бактерий. Жёлчь ограничивает распространение грибковых колоний. Нейтральный pH способствует росту многих патогенных грибов. Согласно данным Литтмана, выделение грибов на этой среде происходило в три раза чаще, чем на агаре Сабуро с декстрозой.

Подготовка образцов и инокуляция

Для инокуляции:

• соскоб кожи или ногтя либо инфицированный волос непосредственно помещают на поверхность агара;

• мокроту, фекалии и другие подобные образцы распределяют по поверхности стерильным тампоном;

• образец также можно предварительно обогатить в бульоне, а затем культивировать на агаризованной среде.

• Тип образца: клинические образцы — соскоб кожи или ногтя, инфицированный волос и другие подобные материалы

• Продолжительность инкубации: до 8 суток

Если необходимо культивировать Nocardia asteroides, Streptomyces или другие чувствительные к стрептомицину микроорганизмы, используют среду без стрептомицина.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 55,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильный стрептомицин до конечной концентрации 30 мкг/мл среды.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

• Цвет: от кремового до жёлтого; возможен зелёный оттенок
• Состояние: однородный, сыпучий порошок без комков

Желирование

• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель синего цвета.

Реакция и pH

• Раствор для определения реакции: 5,5 % масс./об. водный раствор
• Температура определения: 25 °C
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам и лабораторным процедурам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде вариабельный характер роста.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований лаборатории.
3. Не используйте среду для культивирования Nocardia asteroids, Streptomyces и других микроорганизмов, чувствительных к стрептомицину.
4. Для полной идентификации чистых колоний необходимо дополнительно провести серологические и биохимические исследования.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон
• Требование к месту хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. Неправильное хранение или недостаточно плотное закрытие флакона может привести к образованию комков. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных