Цистин-лактоза-электролит-дефицитный агар с индикатором Андреде HiMedia M352-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Цистин-лактоза-электролит-дефицитный агар с индикатором Андреде HiMedia M352-500G (уп/500 гр) предназначена для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей по способности ферментировать лактозу. Среда применяется для культивирования большинства бактериальных возбудителей мочевых инфекций, однако Shigella может не расти, а инкубация более 24 ч способна маскировать нелактозоферментирующие микроорганизмы.

Назначение

Рекомендуемое назначение: выделение и дифференциация возбудителей инфекций мочевых путей на основании ферментации лактозы.

Тип питательной среды: базовая.
Назначение изделия: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
Тип образца: клинический образец мочи.

Цистин-лактозо-электролит-дефицитная среда с индикатором Андреде, также обозначаемая как ЦЛЭН-среда или C.L.E.D. (Cystine-Lactose Electrolyte-Deficient), используется в медицинской бактериологии мочи. Среда поддерживает рост возбудителей инфекций мочевых путей и обеспечивает дифференциацию лактозоферментирующих и нелактозоферментирующих микроорганизмов по окраске колоний.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
Пептон HM B является эквивалентом мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация

Sandys разработал методику, в которой роение Proteus по поверхности агара предотвращалось ограничением содержания электролитов в культуральной среде.

Mackey и Sandys модифицировали среду Sandys, заменив маннитол лактозой и сахарозой, а также повысив концентрацию агара и бромтимолового синего. В последующей модификации лактоза была сохранена, сахароза исключена, а в состав добавлен L-цистин для стимуляции роста карликовых колоний колиформных бактерий, зависимых от цистина. Полученная среда получила обозначение C.L.E.D. — цистин-лактозо-электролит-дефицитная среда.

Среда предназначена для применения в бактериологии мочи и поддерживает рост всех возбудителей инфекций мочевых путей. C.L.E.D.-среда также используется для посева диагностическими полосками и как транспортная среда с посевным материалом для образцов мочи.

Впоследствии Bevis модифицировал C.L.E.D.-среду добавлением индикатора Андреде. Такая модификация обеспечивает более чёткую дифференциацию лактозоферментирующих микроорганизмов (LF) и нелактозоферментирующих микроорганизмов (NLF). Индикатор Андреде усиливает визуальные различия колоний и помогает при идентификации микроорганизмов.

Окраска среды изменяется в зависимости от pH:

Для получения корректных результатов среду не следует инкубировать более 24 ч: при преобладании лактозоферментирующих микроорганизмов вся среда может окраситься в розовый цвет, что замаскирует присутствие нелактозоферментирующих микроорганизмов.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 36,25 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Образец: моча.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами и руководствами.

Среду следует инокулировать сразу после сбора мочи. Результат восстановления микроорганизмов зависит от их количества в моче.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Среда рекомендована для исследования инфекций мочевых путей.
• Низкое количество микроорганизмов в моче может быть связано с антибиотикотерапией или низким pH мочи.
• Предшествующее начало антибиотикотерапии и низкий pH мочи — менее 5 — могут приводить к низкому количеству микроорганизмов в моче инфицированных пациентов.
• Среду следует инокулировать сразу после сбора мочи.
• Виды Shigella могут не расти на этой среде.
• Для получения лучших результатов среду не следует инкубировать более 24 ч. Если лактозоферментирующие микроорганизмы преобладают, вся среда может стать розовой, что маскирует присутствие нелактозоферментирующих микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Желирование

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-синего цвета.

Реакция

Реакция 3,62%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.