Питательная микробиологическая среда HiMedia M352-100G C.L.E.D. агар с индикатором Андраде предназначена для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей по ферментации лактозы. Среда применяется для посева образцов мочи, при этом инкубацию не следует проводить более 24 ч, поскольку преобладание лактозоферментирующих микроорганизмов может замаскировать нелактозоферментирующие колонии.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей на основании способности ферментировать лактозу.

Тип образца: клинический образец мочи.

C.L.E.D. (цистин-лактозная среда с дефицитом электролитов) также применяется для посева мочи методом погружения и в качестве транспортной среды для инокулята мочи при использовании погружных носителей.

Состав

Содержание компонентов рассчитано на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным эксплуатационным параметрам. Компонент HM peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Первоначально Sandys описал методику предотвращения роения микроорганизмов рода Proteus на агаровой среде за счёт ограничения содержания электролитов в культуральной среде.

Среда Sandys была модифицирована Mackey и Sandys: маннит заменили лактозой и сахарозой, а также повысили концентрацию агара и бромтимолового синего. В следующей модификации сахарозу исключили, сохранив лактозу, и добавили L-цистин для стимуляции роста карликовых колоний колиформных бактерий, зависимых от цистина. Полученная среда получила обозначение C.L.E.D. — Cystine-Lactose Electrolyte-Deficient Medium, то есть цистин-лактозная среда с дефицитом электролитов.

Среда способствует росту всех основных возбудителей инфекций мочевых путей и применяется в бактериологии мочи. Дополнительное введение индикатора Андраде обеспечивает более выраженное различие между лактозоферментирующими и нелактозоферментирующими микроорганизмами, улучшает визуализацию колоний и помогает идентифицировать микроорганизмы.

Окраска среды изменяется в зависимости от значения pH:

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 36,25 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Инокулируйте среду непосредственно после сбора образца мочи.
7. Инкубируйте посевы при условиях, установленных лабораторной методикой; для получения корректных результатов продолжительность инкубации не должна превышать 24 ч.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Материалы, загрязнённые после использования, перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Ограничения применения

1. Среда рекомендована для исследования инфекций мочевых путей. Низкое количество микроорганизмов в моче может быть связано с антибиотикотерапией или низким значением pH мочи.
2. Выделение микроорганизмов зависит от их количества в образце мочи.
3. Среду необходимо инокулировать непосредственно после сбора мочи.
4. Микроорганизмы рода Shigella могут не расти на этой среде.
5. Для получения корректных результатов среду не следует инкубировать более 24 ч. При преобладании лактозоферментирующих микроорганизмов вся среда может окраситься в розовый цвет, что маскирует присутствие нелактозоферментирующих микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-синего цвета.

Реакция и pH

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,62 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Klebsiella aerogenes ранее обозначали как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Назначение: агаровая питательная среда для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей по ферментации лактозы
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE
• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2
• pH 3,62%-ного водного раствора при 25 °C: 7,30–7,70
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Температура охлаждения перед разливом: 45–50 °C
• Режим стерилизации: автоклавирование при 121 °