HiMedia M348-100G Основа бульона Бруцелла

Сухая питательная среда HiMedia M348-100G «Основа бульона Бруцелла» для обогащения и культивирования видов Brucella и Campylobacter. Применяется для анализа клинических (фекалии) и неклинических образцов; обеспечивает обильный рост требовательных микроорганизмов.

Принцип измерения

Основа бульона Бруцелла разработана для поддержки интенсивного роста привередливых бактерий, таких как виды Brucella. Поскольку Brucella являются внутриклеточными паразитами, вызывающими эпизоотические аборты у животных, а также септические лихорадочные заболевания или локализованные инфекции костей, тканей и органов у людей, они требуют богатой питательной среды.

Компоненты среды:

• Пептон и триптон: обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие питательные вещества.
• Экстракт дрожжей: служит источником витаминов группы B и дополнительных азотистых соединений.
• Декстроза (глюкоза): выступает в качестве источника энергии.

Среда может быть обогащена 5 % (об/об) стерильной дефибринированной конской кровью. Для селективного выделения видов Brucella в основу добавляются смеси антибиотиков. При необходимости получения неселективной среды используется только основа с добавлением сыворотки.

Методика приготовления и использования

Приготовление основы

1. Суспендируйте 14,05 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.

Добавление компонентов

• Для общего использования: асептически добавьте стерильную 5 % (об/об) инактивированную конскую сыворотку (предварительно инактивированную нагреванием при 56 °C в течение 30 минут).
• Для селективного выделения Brucella: добавьте содержимое одной ампулы селективной добавки NPBCVN (FD005).
• Для выделения видов Campylobacter: добавьте регидратированное содержимое одной ампулы одной из следующих добавок:
  • Селективная добавка Блейзера-Ванга (Blaser-Wang, FD006);
  • Селективная добавка Бютцлера (Butzler, FD007);
  • Селективная добавка Скиррова (Skirrow, FD008);
  • а также добавка минералов для роста (Minerals Growth Supplement, FD009).

После добавления тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Инкубация

Рекомендуется распределить пробирки поровну: половину инкубировать в нормальной атмосфере, вторую половину — в атмосфере, обогащенной 10 % CO₂.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Финальный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации в атмосфере с 10 % CO₂, с добавлением 5 % (об/об) инактивированной конской сыворотки и селективной добавки NPBCVN (FD005) при температуре 35–37 °C в течение 24–72 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и ограничения

• Назначение: только для диагностики in vitro, только для профессионального использования.
• Безопасность: виды Brucella высокоинфекционны. При работе с пробами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица, строго соблюдать правила микробиологической безопасности.
• Утилизация: все загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или сожжены перед утилизацией.
• Ограничение: все предполагаемые анаэробные организмы должны быть идентифицированы с помощью подтверждающих тестов.