HiMedia M348-100G Основа бульона Бруцелла

Питательная среда HiMedia M348-100G Основа бульона Бруцелла представляет собой порошкообразную основу для приготовления жидкой среды. Основа предназначена для обогащения и культивирования видов Brucella и Campylobacter из клинических и неклинических образцов; при работе с Brucella необходимы строгие меры биологической безопасности.

Назначение

Основа бульона Бруцелла применяется для обогащения и культивирования видов Brucella или Campylobacter из клинических и неклинических образцов. Для клинических образцов в качестве типа образца указаны фекалии.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечный pH: 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Принцип действия и интерпретация

Основа бульона Бруцелла разработана для обеспечения обильного роста требовательных бактерий, включая виды Brucella. Виды Brucella являются внутриклеточными паразитами и вызывают эпизоотические аборты у животных, септические лихорадочные заболевания или локализованные инфекции костей, тканей и органов у человека. Из-за высокой требовательности к питательным условиям виды Brucella нуждаются в богатой питательной среде.

Пептон и триптон обеспечивают микроорганизмы азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими питательными веществами. Дрожжевой экстракт также содержит азотистые питательные вещества и служит преимущественно источником витаминов группы B. Декстроза является источником энергии.

Среду можно обогащать стерильной дефибринированной конской кровью в концентрации 5 % об./об. Для селективного выделения видов Brucella в основу вводят смеси антибиотиков. Если требуется неселективная среда, основу бульона Бруцелла применяют только с добавлением сыворотки, без антибиотиков.

Базовая среда с добавлением селективных добавок для Campylobacter также может использоваться для выделения Campylobacter. Виды Brucella обладают высокой инфекционностью, поэтому при работе с ними необходимо соблюдать особую осторожность.

Для инкубации рекомендуется половину пробирок выдерживать в обычной атмосфере, а вторую половину — в атмосфере, обогащённой 10 % CO₂.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 14,05 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильную инактивированную конскую сыворотку в концентрации 5 % об./об. Для получения сыворотки RM1239 проводят инактивацию нагреванием при 56 °C в течение 30 мин.
6. Для селективного выделения микроорганизмов добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005).
7. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Приготовление среды для выделения Campylobacter

Для выделения видов Campylobacter добавьте регидратированное содержимое одного флакона одной из следующих селективных добавок:

• селективная добавка Блазера—Ванга (FD006);
• селективная добавка Бутцлера (FD007);
• селективная добавка Скирроу (FD008);
• минеральная ростовая добавка (FD009).

После внесения добавок тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Тип и обработка образцов

Тип образца

Клинический образец: фекалии.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Виды Brucella высокоинфекционны; при работе с ними необходимо соблюдать особую осторожность.

Ограничения применения

Все предположительно анаэробные микроорганизмы должны быть идентифицированы подтверждающим тестом.

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,81 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,80–7,20.
• pH раствора: 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют при инкубации в атмосфере с 10 % CO₂, с добавлением 5 % об./об. инактивированной конской сыворотки RM1239 и селективной добавки NPBCVN (FD005), при 35–37 °C в течение 24–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на маркировке.
• После вскрытия храните препарат в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните препарат в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Селективные добавки