Сухая питательная среда Основа угольного агара для бордетелл HiMedia M344-500G (уп/500 г). Рекомендуется для культивирования Bordetella pertussis при производстве вакцин, а также для поддержания лабораторных стоковых культур данных микроорганизмов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для выделения бактерий рода Bordetella, включая виды B. pertussis, B. parapertussis, B. bronchiseptica и B. avium. Данные микроорганизмы являются облигатными аэробами и обладают низкой метаболической активностью.

Для первичной изоляции B. pertussis требуется добавление активированного угля и 15–20 % крови для нейтрализации факторов, ингибирующих рост. Угольный агар может использоваться в качестве альтернативы агару Борде-Генгу. При добавлении конской крови среда также может применяться для культивирования и изоляции Haemophilus influenzae.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Инфузия HM B, пептон и экстракт дрожжей: обеспечивают организм необходимыми питательными веществами.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Растворимый крахмал и уголь: нейтрализуют токсичные для бордетелл вещества, такие как жирные кислоты.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,25 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 10 % стерильной дефибринированной крови и содержимое одной ампулы селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Примечание: Для получения шоколадного агара (для видов Haemophilus) следуйте соответствующему протоколу конверсии.

Сбор и обработка образцов

• Тип образца: мазки из носоглотки.
• Транспортировка: мазки собирают на ранней стадии заболевания и помещают в пробирки с половинной концентрацией основы угольного агара, дополненной 10 % v/v лизированной дефибринированной конской кровью и добавкой Bos Selective Supplement (FD004).
• Посев: обильно инокулируют мазки на толстый слой угольного агара с 10 % v/v крови и добавкой FD004. Дополнительно может использоваться неселективная среда (без FD004).
• Инкубация: чашки инкубируют при 35 °C во влажной атмосфере (влажность 60–70 %) до 6 суток.

Анализ результатов

Осмотр чашек проводят через 40 часов инкубации, затем дважды в день. Колонии Bordetella выглядят как маленькие, блестящие, серовато-белые, круглые. Результаты подтверждают методом прямой иммунофлуоресценции (DFA).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Эквивалентно инфузии из сердец говяжьих

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: серый или серовато-черный гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,8 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: черный непрозрачный гель с нерастворенными черными частицами
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением стерильной дефибринированной крови и селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

• При раздавлении среды осторожно встряхивайте колбу для получения однородной суспензии угля, так как он имеет тенденцию оседать на дно.
• Результаты должны быть подтверждены тестом DFA.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Соблюдайте стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами и инфекционным материалом.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте крышку во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.

Комплект поставки и совместимость

• Основа угольного агара M344-500G, 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Рекомендуемая добавка:

• FD004 Bordetella Selective Supplement / Селективная добавка для бордетелл