Основа агара с желчью и эскулином HiMedia M340-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Основа агара с желчью и эскулином HiMedia M340-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для приготовления желчно-эскулинового агара с конечным pH 6,6 ± 0,2. Среда предназначена для дифференциального выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D, включая энтерококки, в пищевых и фармацевтических образцах; для проведения реакции требуется добавление эскулина FD050.

Назначение

Основа агара с желчью и эскулином с добавлением эскулина предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов.

Среда применяется для:

• выделения и предварительной идентификации энтерококков;
• дифференциального выявления стрептококков группы D;
• анализа пищевых образцов;
• анализа фармацевтических образцов.

Для идентификации энтерококков рекомендуется дополнительно выполнять другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M340-500G
• Форма выпуска: порошок
• Тип питательной среды: диагностическая
• Тип продукта: стандартный
• Назначение изделия: агар
• Тип происхождения: химически определённая среда
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,40–6,80

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. По составу продукт эквивалентен мясному экстракту.

Состав

Состав, г/л:

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преимущественными нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка. Вокруг колоний появляется зона чёрного осадка, что используется для визуальной интерпретации реакции гидролиза эскулина.

Желчно-эскулиновый агар первоначально был разработан для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда также позволяет дифференцировать стрептококки группы D от стрептококков, не относящихся к группе D.

Гидролиз эскулина на этой среде может использоваться для дифференциации представителей семейств и родов Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae.

При разливе среды в пробирки в виде скошенного агара положительная реакция определяется по почернению более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует или за 24–48 ч почернело менее половины скошенной поверхности, реакцию считают отрицательной.

Для усиления роста энтерококков в желчно-эскулиновый агар можно добавить 50 мл/л лошадиной сыворотки.

Методика приготовления среды и проведения анализа

1. Суспендируйте 31,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Охладите раствор до 45–50 °C.
4. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона эскулина FD050.
5. Перемешайте среду.
6. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
7. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) при 121 °C в течение 15 мин.
8. Для приготовления скошенной среды оставьте пробирки в наклонном положении до затвердевания агара.

Посев и инкубация

1. Инокулируйте исследуемый образец в бульон Todd Hewitt (M313).
2. Инкубируйте культуру в течение 24 ч.
3. Внесите две капли полученной культуры на поверхность скошенной среды или чашки с агаром.
4. Инкубируйте посевы в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа (CO₂) при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до коричневато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри или пробирках в виде скошенной среды образуется раствор янтарного цвета — прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция и pH

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 6,35 % масс./об. при 25 °C.

• Реакция раствора: pH 6,6 ± 0,2
• Измеренный диапазон pH: 6,40–6,80

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эскулина FD050 и инкубации в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа (CO₂) при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Стрептококки группы viridans иногда дают слабую положительную реакцию.
• Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, могут давать положительную желчно-эскулиновую реакцию.
• Для подтверждающей идентификации энтерококков необходимо выполнять дополнительные тесты, включая определение устойчивости к соли.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветри