HiMedia M340-100G Основа желчно-эскулинового агара

Основа желчно-эскулинового агара HiMedia M340-100G предназначена для дифференциального выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D. Среда применяется для анализа пищевых и фармацевтических продуктов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Стрептококки группы D обладают специфическим липотейхоевым антигеном в клеточных стенках. Энтерококки и стрептококки группы D способны гидролизовать эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа (III), образуя коричнево-чёрный осадок.

Желчно-эскулиновый агар позволяет дифференцировать стрептококки группы D от стрептококков других групп, а также отделять роды Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter, Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина.

Интерпретация результатов:

• Положительная реакция: появление зоны чёрного осадка вокруг колоний. При использовании среды в виде скоса (slant) положительным считается почернение более половины скоса в течение 24–48 часов.
• Отрицательная реакция: полное отсутствие почернения или почернение менее половины скоса в течение 24–48 часов.

Особенности:

• Вириданс-стрептококки иногда дают слабую положительную реакцию.
• Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат.
• Для усиления роста энтерококков среду можно дополнить конской сывороткой (50 мл/л).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендировать 31,75 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Охладить до 45–50 °C.
4. Добавить содержимое одного флакона эскулина (FD050), тщательно перемешать.
5. Разлить по пробиркам или колбам.
6. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
7. Для получения скосов оставить среду застывать в наклонном положении.

Процедура посева

1. Образец инокулируют и инкубируют в бульоне Тодда-Хьюитта (M313).
2. После 24 часов инкубации нанести две капли культуры на поверхность скоса или поверхность чашки с агаром.
3. Инкубировать в атмосфере с повышенным содержанием CO₂ при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,6 $\pm$ 0,2

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до коричневато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: янтарный раствор, от прозрачного до слегка опалесцирующего с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 6,40–6,80 (для 6,35% в/в водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

(с добавлением эскулина FD050, инкубация в атмосфере с повышенным CO₂ при 35–37 °C в течение 18–24 ч)

Область применения

• Типы образцов: пищевые продукты, фармацевтические препараты.
• Сбор и обработка: сбор проб пищевых и фармацевтических продуктов должен осуществляться в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.
• Утилизация: загрязнённые материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

При работе со средой и культурами использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.