HiMedia M340-100G Основа желчно-эскулинового агара

Питательная микробиологическая среда HiMedia M340-100G Основа желчно-эскулинового агара представляет собой порошковую основу массой 100 г с конечным pH 6,6±0,2. Предназначена для дифференциального выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D в пищевых и фармацевтических образцах.

Назначение и область применения

Основа желчно-эскулинового агара с добавлением эскулина применяется для селективного выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D из пищевых и фармацевтических продуктов.

Тип образцов:

• пищевые образцы;
• фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

HM peptone B является эквивалентом мясного экстракта.

• Конечный pH при 25 °C: 6,6±0,2

Приготовление среды

1. Приостановите 31,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
4. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона эскулина FD050.
5. Перемешайте и разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
6. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
7. Дайте среде затвердеть в пробирках, установленных в наклонном положении.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преимущественными нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка. В результате вокруг колоний формируется зона чёрного осадка.

Желчь подавляет рост большинства сопутствующих бактерий. Пептон и HM peptone B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и необходимых питательных веществ для роста.

Если среда разлита в пробирки в виде скошенного агара, положительная реакция определяется по почернению более половины скошенной части в течение 24–48 ч. При полном отсутствии почернения либо при почернении менее половины скошенной части в течение 24–48 ч результат теста считают отрицательным.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат желчно-эскулинового теста.

Желчно-эскулиновый агар также способствует дифференциации Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина. Для идентификации энтерококков необходимо выполнять дополнительные тесты, включая определение устойчивости к соли.

Для усиления роста энтерококков в желчно-эскулиновый агар можно добавить 50 мл/л конской сыворотки.

Подготовка и инокуляция образца

1. Инокулируйте исследуемый образец в бульон Тодда—Хьюитта M313.
2. Инкубируйте культуру в течение 24 ч.
3. После инкубации внесите две капли культуры на поверхность скошенной или чашечной питательной среды.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют для среды с добавленным эскулином FD050 в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от кремового до коричневато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри или пробирках в виде скошенной среды образуется раствор янтарного цвета — прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция среды

• Концентрация водного раствора: 6,35 % масса/объём.
• Температура определения: 25 °C.
• pH: 6,6±0,2.

Диапазон pH

pH: 6,40–6,80.

Технические характеристики

• Наименование: HiMedia M340-100G Основа желчно-эскулинового агара
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Условия хранения нераскрытого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,6±0,2
• Диапазон pH: 6,40–6,80

Условия хранения и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

• Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию.
• Для идентификации энтерококков необходимо выполнять дополнительные тесты, например определение устойчивости к соли.

Обращение с образцами и меры безопасности

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для фармацевтических образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной