HiMedia M339F-500G Модифицированный ацетатный дифференциальный агар

Модифицированный ацетатный дифференциальный агар HiMedia M339F-500G предназначен для дифференциации видов Shigella и Escherichia coli в соответствии с методикой FDA BAM (2017). Среда используется для идентификации изолированных микроорганизмов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда разработана на основе модификации цитратной среды Симмонса. Большинство бактерий способны использовать цитрат и ацетат в качестве источников углерода для роста при наличии органического азота. Эта особенность позволяет дифференцировать Shigella от близкородственных организмов, таких как E. coli.

При утилизации ацетата натрия происходит щелочная реакция, которая фиксируется индикатором бромтимоловым синим, что приводит к изменению цвета среды на синий. E. coli активно утилизирует ацетат (положительная реакция), в то время как Shigella не проявляет этой способности (отрицательная реакция), и среда остается зеленой.

Методика проведения анализа

Подготовка образца

1. Асептически взвесьте 25 г образца в 225 мл бульона для Shigella (M1326) с добавлением новобиоцина.
2. Инкубируйте в анаэробных условиях при 44,0 °C в водяной бане в течение 20 ч.
3. Выполните посев на чашки с агаром МакКонки (M081D) и инкубируйте 20 ч при 35 °C.
4. После окрашивания по Грамму проведите биохимическое подтверждение.

Процедура анализа

1. Инокулируйте культуры в пробирки с модифицированным ацетатным дифференциальным агаром (в виде скоса и столбика).
2. Инкубируйте в течение ночи при 35 °C.
3. Оцените результат по цвету: образование синего окрашивания указывает на утилизацию ацетата (положительный результат, характерно для E. coli); отсутствие изменения цвета (среда остается зеленой) указывает на отрицательный результат (характерно для Shigella).

Приготовление среды

1. Растворите 29,28 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по пробиркам в объеме, достаточном для формирования столбика и скоса.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки, удерживая их в наклонном положении.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,70 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 25–30 °C в течение 1–7 суток.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до светло-зеленого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель изумрудно-зеленого цвета.

Ограничения и предостережения

• Некоторые штаммы Escherichia coli утилизируют ацетат медленно или не утилизируют его вовсе, что может привести к ложноотрицательному результату.
• При работе с культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности, используйте средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрыть во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.