Основа ксилозо-лизинового агара HiMedia M336-500G (уп/500 гр)
Основа ксилозо-лизинового агара HiMedia M336-500G (уп/500 гр) — сухая диагностическая питательная среда для выделения и идентификации патогенных кишечных бактерий, с конечным значением pH 7,4 ± 0,2. Основа применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов; для селективности допускается добавление бриллиантового зелёного или натрий дезоксихолата.
Описание
Основа ксилозо-лизинового агара HiMedia M336-500G (уп/500 гр) — сухая диагностическая питательная среда для выделения и идентификации патогенных кишечных бактерий, с конечным значением pH 7,4 ± 0,2. Основа применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов; для селективности допускается добавление бриллиантового зелёного или натрий дезоксихолата.
Назначение
Рекомендуется для выделения и идентификации патогенных кишечных бацилл.
Тип питательной среды: диагностическая
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Фасовка: 500 г
Состав
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Дрожжевой экстракт | 3,000 |
| L-лизин | 5,000 |
| Лактоза | 7,500 |
| Сахароза | 7,500 |
| Ксилоза | 3,500 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Феноловый красный | 0,080 |
| Агар | 13,500 |
Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 45,08 г порошка в 980 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Кипятите суспензию в течение 1 мин.
- При необходимости добавьте бриллиантовый зелёный.
- Стерилизуйте автоклавированием при 118 °C и давлении около 0,097 МПа (14 фунтов на квадратный дюйм) в течение 10 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте 20 мл стерильного водного раствора, содержащего 34 % тиосульфата натрия и 4 % цитрата аммонийного железа.
- Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Основа ксилозо-лизинового агара сформулирована в соответствии с модификациями Taylor для селективного выделения, дифференциации и количественного определения грамотрицательных кишечных бацилл.
Селективность среды для кишечных бацилл повышается добавлением дезоксихолата натрия; получаемая среда называется ксилозо-лизин-дезоксихолатным агаром (XLD). Добавление красителя бриллиантового зелёного позволяет сделать среду селективной для Salmonella.
Дрожжевой экстракт обеспечивает среду азотом и витаминами, необходимыми для роста микроорганизмов. Ксилоза, лактоза и сахароза являются источниками сбраживаемых углеводов. Ксилоза включена в состав главным образом потому, что не сбраживается Shigella, но сбраживается практически всеми кишечными бактериями, что позволяет дифференцировать виды Shigella.
Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро сбраживает ксилозу и исчерпывает её запас. После этого лизин декарбоксилируется ферментом лизиндекарбоксилазой с образованием аминов и возвратом среды к щелочному значению pH, что имитирует реакцию Shigella.
Для предотвращения аналогичной реакции у лизинположительных колиформ в состав добавлены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы с образованием кислоты вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый.
Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красного окрашивания вокруг колоний вследствие повышения pH. Реакции могут протекать одновременно или последовательно, поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или изменять цвет с жёлтого на красный.
Для повышения дифференцирующей способности состава применяется система индикации H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммонийного железа. Система позволяет визуализировать образующийся сероводород; результатом является формирование колоний с чёрными центрами.
Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся ими кислая реакция препятствует почернению колоний.
Типы образцов
- Клинические образцы: фекалии.
- Пищевые и молочные образцы.
- Образцы воды.
Сбор и обращение с образцами
Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.
Для образцов воды применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Меры предосторожности
- Только для диагностики in vitro.
- Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
- При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
- При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
- При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
- При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.
Ограничения метода
Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.
Эффективность среды
Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.
Контроль качества
Внешний вид: однородный, сыпучий, свободно текущий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,51 % масс./об. при 25 °C.
pH: 7,20–7,60.
Культуральные характеристики определяют после добавления стерильного водного раствора, содержащего 34 % тиосульфата натрия и 4 % цитрата аммонийного железа, и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии |
|---|---|---|---|---|
| # Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | жёлтый |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | жёлтый |
| Proteus mirabilis ATCC 25933 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | серый с чёрными центрами |
| Proteus vulgaris ATCC 13315 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | серый с чёрными центрами |
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный с чёрными центрами |
| Salmonella Paratyphi A ATCC 9150 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный |
| Salmonella Paratyphi B ATCC 8759 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный с чёрными центрами |
| Salmonella Typhi ATCC 6539 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный с чёрными центрами |
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный с чёрными центрами |
| Shigella dysenteriae ATCC 13313 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный |
| Shigella sonnei ATCC 25931 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | красный |
| Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*) | 50–100 | хороший | ≥30 % | красный |
* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.
Хранение и срок годности
- Температура хранения порошка: 10–30 °C.
- Условия хранения порошка: в плотно закрытом контейнере.
- Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
- Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
- После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
- Неправильное хранение может привести к образованию комков.
- Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
- После каждого использования плотно закрывать контейнер.
- Рабочие характеристики среды оптимальны при использовании в пределах установленного срока годности.
Утилизация
Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Тип питательной среды
| Тип питательной среды | Диагностический |
|---|
Сертификат
| Сертификат | ФСЗ 2009/03709 |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
