Основа ксилозо-лизинового агара HiMedia M336-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Основа ксилозо-лизинового агара HiMedia M336-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для выделения и идентификации патогенных кишечных бацилл.

Принцип измерения и интерпретация

Основа ксилозо-лизинового агара (XL Agar Base) разработана по модификациям Тейлора для селективного выделения, дифференциации и количественного учета грамотрицательных кишечных бацилл.

Принцип дифференциации основан на следующем:

• Источники питания: экстракт дрожжей обеспечивает азот и витамины. Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов.
• Дифференциация Shigella: ксилоза включена в состав, так как она практически не ферментируется видами Shigella, но ферментируется почти всеми остальными кишечными бактериями.
• Дифференциация Salmonella: лизин используется для отличия группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро ферментирует ксилозу, после чего происходит декарбоксилирование лизина под действием фермента лизин-декарбоксилазы с образованием аминов. Это приводит к возврату среды в щелочную реакцию (pH повышается), что имитирует реакцию Shigella.
• Подавление колиформ: для предотвращения аналогичной реакции лизин-положительными колиформами добавлены лактоза и сахароза, которые производят избыток кислоты.
• Индикация pH: расщепление ксилозы, лактозы и сахарозы до кислоты вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на желтый. Бактерии, декарбоксилирующие лизин до кадаверина, распознаются по появлению красного окрашивания вокруг колоний из-за повышения pH. Эти реакции могут протекать одновременно или последовательно, что приводит к различным оттенкам цвета или смене цвета с желтого на красный при длительной инкубации.
• Индикация H₂S: система индикации сероводорода, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата железа-аммония, позволяет визуализировать выделяемый H₂S, что приводит к образованию колоний с черными центрами. Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому кислая реакция препятствует почернению колоний.

Среда может быть модифицирована:

• Добавлением дезоксихолата натрия она превращается в агар XLD.
• Добавлением красителя бриллиантового зеленого она становится селективной для Salmonella.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 45,08 г порошка в 980 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Прокипятите в течение 1 минуты.
3. При необходимости добавьте бриллиантовый зеленый.
4. Стерилизуйте в автоклаве при 118 °C (≈0,097 МПа / 14 фунтов давления) в течение 10 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Асептически добавьте 20 мл стерильного водного раствора, содержащего 34 % тиосульфата натрия и 4 % цитрата железа-аммония.
7. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.
• Образцы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до светло-розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или очень слабо опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением стерильного водного раствора (34 % тиосульфата натрия и 4 % цитрата железа-аммония) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Использование только для диагностики in vitro.
• При работе с клиническими образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.