Основа агара Вильсона Блера для выделения сальмонелл HiMedia M331-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды HiMedia M331-500G (уп/500 гр) для агара Вильсона — Блера с содержанием агара 30,000 г/л. Основа применяется с селективным реагентом для выделения Salmonella Typhi из клинических, пищевых, молочных и водных образцов; хранение среды в холодильнике при 4 °C ограничено сроком не более 2 суток.

Назначение

Основа агара Вильсона — Блера предназначена для приготовления селективной питательной среды с последующим выделением Salmonella Typhi. Применение осуществляется после добавления селективного реагента, 1%-ного раствора бриллиантового зелёного и проведения стерилизации приготовленной основы.

Среда предназначена для работы специалистов микробиологических и санитарно-бактериологических лабораторий. Изделие используется для анализа:

• клинических образцов — фекалий;
• пищевых и молочных образцов;
• образцов воды.

Изделие предназначено для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров рабочих характеристик. HM peptone B эквивалентен мясному экстракту.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Salmonella — род грамотрицательных энтеробактерий, часто связанных с пищевыми инфекциями и являющихся возбудителями брюшного тифа и паратифов. Виды Salmonella выделяют от людей и животных. Известно более 2000 сероваров Salmonella, каждый из которых характеризуется определённой специфичностью к хозяину.

Люди являются единственным известным природным резервуаром для серотипа Salmonella Typhi и серотипов Salmonella Paratyphi A, B и C. Передача микроорганизма происходит фекально-оральным путём; выделение осуществляется с фекалиями, а распространение возможно через загрязнённую воду, пищу или при контакте от человека к человеку при несоблюдении правил личной гигиены.

Агар Вильсона — Блера, разработанный Wilson и Blair, рекомендуется для выделения видов Salmonella, особенно Salmonella Typhi, из клинических образцов. Формула селективного реагента представляет собой модификацию бисмут-сульфитного реагента, описанного Hajna и Perry. Среда обладает высокой селективностью в отношении Salmonella и подавляет рост колиформных бактерий, Proteus и Shigella.

Отдельные штаммы колиформных бактерий могут давать рост в виде тускло-зелёных или коричневых колоний, но без окружающего металлического блеска. Среда также пригодна для выделения лактозоферментирующих штаммов Salmonella, которые невозможно дифференцировать на дифференциальных средах, содержащих лактозу, поскольку лактоза не является ферментируемым субстратом данной среды.

Функции компонентов:

• специальный пептон и HM peptone B обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, а также другие питательные вещества, необходимые для роста;
• бриллиантовый зелёный подавляет рост всех грамположительных бактерий;
• декстроза является ферментируемым углеводом;
• сульфат железа способствует образованию H₂S;
• висмут относится к тяжёлым металлам и подавляет большинство грамотрицательных кишечных палочек, за исключением Salmonella;
• сульфат железа восстанавливается видами Salmonella в присутствии сульфита висмута и декстрозы с образованием сульфида железа, что проявляется формированием колоний чёрного цвета;
• двузамещённый фосфат натрия обеспечивает буферное действие среды;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 60,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа.
4. Охладите стерильную расплавленную основу до 45–50 °C.
5. Добавьте к стерильной расплавленной основе 4 мл 1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
6. Добавьте 70 мл селективного реагента.
7. Приготовьте каждый раствор селективного реагента отдельно в соответствии с составом ниже.
8. Объединённый раствор кипятите до появления серо-сланцевой окраски.
9. Тщательно перемешайте приготовленную среду и разлейте её в стерильные чашки Петри.

Состав растворов селективного реагента

• Раствор 1: 40 г сульфита натрия в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 2: 21 г двузамещённого фосфата натрия (гидрофосфата динатрия) в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 3: 12,5 г цитрата висмута-аммония в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 4: 0,96 г сульфата железа в 20 мл дистиллированной воды с добавлением 2 капель соляной кислоты.

Требования к образцам и обращению с ними

• При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно действующим лабораторным руководствам.
• При работе с пищевыми и молочными образцами применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• При работе с образцами воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный свободно пересыпающийся порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 3,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• После добавления селективного реагента и 1%-ного бриллиантового зелёного: непрозрачный гель зеленовато-жёлтого цвета в чашках Петри.

Реакция и pH

• Реакция: реакция 6,0%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH по реакции раствора: 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавлением 1%-ного бриллиантового зелёного и селективных реагентов при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Обозначение *: соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Не храните приготовленную среду в холодильнике при 4 °C дольше 2 суток. При более длительном хранении среда меняет цвет на зелёный, что приводит к снижению селективности.

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Состояние упаковки при хранении: плотно закрытый контейнер.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при соблюдении установленного срока годности и рекомендованных условий хранения.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/ар