Основа агара Вильсона Блера для выделения сальмонелл HiMedia M331-500G (уп/500 гр)

Элективная основа агара Вильсона Блера для выделения сальмонелл HiMedia M331-500G (уп/500 г). Применяется с добавлением селективного реагента для выделения Salmonella Typhi из клинических, пищевых и водных образцов; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Вильсона Блера рекомендуется для выделения видов Salmonella, в особенности Salmonella Typhi, из клинических материалов. Селективный реагент представляет собой модификацию висмут-сульфитного реагента. Среда обладает высокой селективностью к Salmonella и подавляет рост колиформ, Proteus и Shigella. Отдельные штаммы колиформ могут образовывать тусклые зеленые или коричневые колонии, но без характерного металлического блеска. Среда также подходит для выделения лактозоположительных штаммов Salmonella, так как лактоза не является ферментируемым субстратом в данной композиции.

Роль компонентов:

• Специальный пептон и пептон HM B: источники азота, углерода и питательных веществ.
• Краситель бриллиантовый зеленый: ингибирует рост всех грамположительных бактерий.
• Декстроза: ферментируемый углевод.
• Сульфат железа (II): способствует образованию H₂S.
• Висмут: тяжелый металл, подавляющий большинство грамотрицательных энтеробактерий, кроме Salmonella.
• Сульфат железа (II) восстанавливается видами Salmonella в присутствии висмут-сульфита и декстрозы с образованием сульфида железа, что проявляется в виде черных колоний.
• Гидрофосфат натрия двунатриевый: буферный агент.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

Методика приготовления и использования

Приготовление основы

1. Суспендируйте 60,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.

Приготовление селективного реагента

Необходимо подготовить четыре отдельных раствора:

• Раствор 1: 40 г сульфита натрия в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 2: 21 г гидрофосфата натрия двунатриевого в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 3: 12,5 г цитрата висмута-аммония в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 4: 0,96 г сульфата железа (II) в 20 мл дистиллированной воды с добавлением 2 капель соляной кислоты (HCl).

Смешайте полученные растворы и кипятите объединенный состав до появления сланцево-серого цвета.

Финальная сборка среды

В стерильную расплавленную основу добавьте:

• 4 мл 1 % раствора бриллиантового зеленого.
• 70 мл приготовленного селективного реагента. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Область применения

Среда предназначена для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные продукты.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Тип среды: Элективная основа

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 3,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления селективного реагента и бриллиантового зеленого: зеленовато-желтый непрозрачный гель.
• Реакция: pH 6,0 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании 1 % бриллиантового зеленого и селективных реагентов после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Ограничение: не хранить готовую среду в холодильнике (4 °C) более 2 дней, так как среда приобретает зеленый цвет и теряет селективность.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование только профессионалами в лабораторных условиях (In Vitro).
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными протоколами работы с инфекционными материалами.