HiMedia M331-100G Основа агара Вильсона-Блэра

Основа агара Вильсона-Блэра HiMedia M331-100G — сухая питательная среда для выделения бактерий рода Salmonella, в частности Salmonella Typhi. Применяется для анализа клинических образцов (фекалии), проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда Вильсона-Блэра является высокоселективной для Salmonella и подавляет рост колиформ, Proteus и Shigella.

Механизм селекции и индикации:

• Специальный пептон и пептон HM B обеспечивают азот, углерод и питательные вещества.
• Краситель бриллиантовый зеленый подавляет рост всех грамположительных бактерий.
• Декстроза служит ферментируемым углеводом.
• Сульфат железа (II) способствует образованию H₂S.
• Висмут (тяжелый металл) ингибирует большинство грамотрицательных энтерических бацилл, кроме Salmonella.
• В присутствии висмута, сульфита, декстрозы и сульфата железа (II) виды Salmonella восстанавливают железо, что приводит к образованию сульфида железа и появлению черных колоний.
• Гидрофосфат натрия двухзамещенный служит буфером, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Область применения

Среда предназначена для выделения Salmonella из следующих типов образцов:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные продукты.
• Пробы воды.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 60,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.

Приготовление селективного реагента

Необходимо подготовить четыре отдельных раствора:

• Раствор 1: 40 г сульфита натрия в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 2: 21 г гидрофосфата натрия двухзамещенного в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 3: 12,5 г цитрата висмута-аммония в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 4: 0,96 г сульфата железа (II) в 20 мл дистиллированной воды с добавлением 2 капель соляной кислоты.

Смешать все четыре раствора и кипятить объединенный состав до появления сланцево-серого цвета.

Финальная сборка среды

В стерильную расплавленную основу добавить:

• 4 мл 1% раствора бриллиантового зеленого.
• 70 мл приготовленного селективного реагента. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 3,0% агаром
• Цвет и прозрачность: базовая среда — светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления реагентов — зеленовато-желтый непрозрачный гель
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Спецификации производителя

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов (с добавлением 1% бриллиантового зеленого и селективных реагентов).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Ограничение: не хранить готовую среду в холодильнике (4 °C) более 2 дней, так как среда приобретает зеленый цвет и теряет селективность.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать бутыль во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в In Vitro диагностике.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.