EMB агар HiMedia M317-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда HiMedia EMB агар HiMedia M317-500G (уп/500 гр) с конечным pH 7,2±0,2. Предназначена для выделения и дифференциации грамотрицательных энтеробактерий из клинических и неклинических образцов, при этом выделенные колонии требуют подтверждающих тестов.

Назначение

Среда предназначена для выделения и дифференциации грамотрицательных энтеробактерий из клинического и другого материала.

Тип питательной среды: диагностическая.

Тип питательной среды: дифференциальная.

Назначение изделия: агар.

Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

Конечный pH при 25 °C: 7,2±0,2.

Принцип действия и интерпретация

Эозин-метиленовый синий агар (EMB) первоначально разработан Holt-Harris и Teague и позднее модифицирован Levine. Состав среды объединяет формулы Levine и Holt-Harris–Teague: пептон и фосфат введены в соответствии с формулой Levine, а два углевода — в соответствии с формулой Holt-Harris–Teague.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Эти красители служат дифференциальными индикаторами при ферментации углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

Сахароза добавлена как альтернативный источник углеводов для типично лактозоферментирующих грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно.

Колонии колиформных бактерий приобретают пурпурно-чёрную окраску вследствие поглощения комплекса красителей метиленовый синий–эозин при снижении pH. Комплекс красителей абсорбируется колонией. Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка, что приводит к растворению комплекса метиленовый синий–эозин и образованию бесцветных колоний.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего. Для подтверждения выделенных микроорганизмов требуются дополнительные тесты.

Функции компонентов:

• Пептон: источник углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ.
• Лактоза и сахароза: источники энергии в виде ферментируемых углеводов.
• Эозин Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Фосфат: буфер среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 35,96 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Не допускайте перегрева.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть для восстановления его синей окраски, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Если посев на EMB агар выполняется в тот же день, среду допускается использовать без автоклавирования.

Проведение анализа

Исследуемый образец можно непосредственно высевать штриховым методом на чашки с приготовленной средой.

Инокулированные чашки следует инкубировать в защищённом от света месте. Для получения изолированных колоний необходимо соблюдать стандартные процедуры посева и инкубации.

Одновременно с EMB агаром следует инокулировать неселективную питательную среду. Для идентификации изолированных колоний необходимо дополнительно провести подтверждающие тесты.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекальные образцы.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Использовать для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с микроорганизмами, не указанными в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований применения.
3. Для идентификации выделенных колоний необходимо дополнительно провести подтверждающие тесты.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: красновато-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком, образующийся в чашках Петри.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,6 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.
• #