HiMedia M317-100G EMB агар

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia M317-100G EMB агар (эозин-метиленовый синий агар) для изоляции и дифференциации грамотрицательных энтерических бактерий. Применяется при анализе клинических образцов, проб пищевых продуктов и воды; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой комбинацию формул Левина, Холта-Харриса и Тига. В состав входят пептон и фосфат (по Левину), а также два углевода (по Холту-Харрису и Тигу).

Метиленовый синий и эозин-Y в определенном соотношении (приблизительно 6:1) частично подавляют рост грамположительных бактерий и служат дифференциальными индикаторами ферментации углеводов. Сахароза добавлена как альтернативный источник энергии для грамотрицательных бацилл, которые медленно ферментируют лактозу или не делают этого вовсе.

Интерпретация результатов:

• Колиформы: образуют пурпурно-черные колонии из-за поглощения комплекса красителей метиленового синего и эозина при снижении pH.
• Неферментирующие организмы: вероятно, повышают pH окружающей среды за счет окислительного дезаминирования белка, что приводит к растворению комплекса красителей и образованию бесцветных колоний.
• Ограничения: некоторые штаммы Salmonella и Shigella могут не расти в присутствии эозина и метиленового синего; для их подтверждения требуются дополнительные тесты.

Функции компонентов:

• Пептон: источник углерода, азота и основных питательных веществ.
• Лактоза и сахароза: ферментируемые углеводы, источники энергии.
• Эозин-Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Фосфат: буферный агент.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендировать 35,96 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешать до однородного состояния.
3. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 lbs) в течение 15 минут. Избегать перегрева.
5. Охладить до 45–50 °C и встряхнуть среду для окисления метиленового синего (восстановления синего цвета) и распределения хлопьевидного осадка.

Примечание: если посев на EMB агар производится в тот же день, стерилизация в автоклаве может быть пропущена.

Посев и инкубация

• Образец наносится методом штриха на поверхность чашек с агаром.
• Инкубировать plates, защищая их от воздействия света.
• Для получения изолированных колоний следует соблюдать стандартные микробиологические процедуры.
• Параллельно с EMB агаром рекомендуется использовать неселективную среду.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в чашках Петри.
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 (для 3,6% водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и типы образцов

Среда предназначена для работы с следующими типами проб:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

При сборе и обработке образцов следует руководствоваться установленными стандартами и местными нормами.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.
• Меры предосторожности: хранить среду в защищенном от света месте для предотвращения фотоокисления.

Ограничения и предупреждения

• Индивидуальные организмы могут демонстрировать вариативность роста на данной среде.
• Каждая партия протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести собственную валидацию.
• Только для профессионального использования в In Vitro диагностике.
• Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) и соблюдение правил микробиологической безопасности.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.