Основа агара Тинсдаля HiMedia M314-500G (уп/500 гр)

Диагностическая дифференциальная питательная среда Основа агара Тинсдаля HiMedia M314-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae. Основа применяется при исследовании мазков из зева, но не предназначена для первичного посева, поскольку может не поддерживать рост некоторых штаммов Corynebacterium diphtheriae.

Назначение

Основа агара Тинсдаля предназначена для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae.

Тип питательной среды: диагностическая, дифференциальная.
Назначение изделия: основа питательной среды.
Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03709.

По заявке поставляется добавка FD073 для выделения дифтерийных бактерий: Tinsdale Selective Supplement, части A и B.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных характеристик эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 40,67 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте селективную добавку Тинсдаля FD073, части A и B.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Коринебактерии представляют собой грамположительные неспорообразующие неподвижные палочки. Клетки часто имеют булавовидную форму; для них также характерно неравномерное окрашивание гранул, из-за чего клетки могут выглядеть полосатыми или бусообразными. Большинство коринебактерий являются аэробными или факультативными, однако встречаются и микроаэрофильные виды.

Corynebacterium diphtheriae продуцирует сильнодействующий экзотоксин, вызывающий дифтерию у человека. В естественных условиях C. diphtheriae обнаруживается в носоглотке инфицированных людей или здоровых носителей.

Известны три биотипа C. diphtheriae: mitis, intermedius и gravis. Признаки и симптомы дифтерии включают боль в горле, недомогание, головную боль и тошноту.

Среда «Агар Тинсдаля» была разработана Тинсдейлом для селективного выделения и дифференциации C. diphtheriae среди дифтероидов. Позднее Биллингс модифицировал среду, повысив извлечение и дифференцирующие свойства C. diphtheriae. Представленная формула соответствует модифицированной среде Биллингса.

Мур и Парсонс подтвердили, что образование ореола является характерным свойством C. diphtheriae, за исключением C. ulcerans, который формирует колонии с аналогичными признаками.

Пептон является источником азотистых соединений. L-цистин и тиосульфат натрия образуют индикаторную систему для выявления H₂S. Теллурит калия, входящий в состав добавки, подавляет все грамотрицательные бактерии и большинство представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей.

C. diphtheriae образует серовато-чёрные колонии, окружённые тёмно-коричневым ореолом. Дифтероиды, обычно встречающиеся в верхних дыхательных путях, как правило, не образуют таких колоний. Тёмно-коричневый ореол вокруг колонии обусловлен образованием H₂S из цистина и его взаимодействием с солью теллурита.

Среда Тинсдаля пригодна для рутинного культивирования и выделения C. diphtheriae. Образование ореола сохраняется на прозрачной среде и характерно для C. diphtheriae и C. ulcerans. C. ulcerans, обнаруживаемый в носоглотке, формирует колонии, сходные с колониями C. diphtheriae, поэтому для подтверждения требуется дополнительное биохимическое исследование.

Не инкубируйте чашки в атмосфере с 5–10 % CO₂, поскольку это замедляет развитие характерных ореолов.

Среда Тинсдаля не подходит для первичного посева, так как может не поддерживать рост некоторых штаммов C. diphtheriae. C. ulcerans, C. pseudotuberculosis и, в редких случаях, виды рода Staphylococcus могут образовывать на агаре Тинсдаля характерный ореол.

Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабое потемнение среды уже через 18 ч. Поэтому чашки следует оценивать после полного периода инкубации — через 48 ч.

Исследуемый материал

Тип образца: клинический материал — мазок из зева.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Не инкубируйте чашки в атмосфере с 5–10 % CO₂, поскольку это замедляет развитие характерных ореолов.
2. Среда не предназначена для первичного посева, так как может не поддерживать рост некоторых штаммов C. diphtheriae.
3. C. ulcerans, C. pseudotuberculosis и, редко, виды рода Staphylococcus способны образовывать характерный ореол; для идентификации C. diphtheriae требуется дополнительное биохимическое подтверждение.
4. Оценку результатов следует проводить после полного периода инкубации 48 ч, поскольку через 18 ч некоторые микроорганизмы могут вызывать только слабое потемнение среды.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении согласно инструкции на этикетке, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,07 % масс./об. при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч с добавлением селективной добавки Тинсдаля FD073, частей A и B.

Примечание: * — соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения порошка: 10–30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами.

Технические характеристики