HiMedia M301-500G Основа EMB агара

Базовая среда HiMedia M301-500G Основа EMB агара для дифференциации и изучения различных энтеробактерий. Используется в качестве основы, в которую добавляются различные углеводы и другие исследуемые вещества; вес упаковки 500 г.

Область применения

Среда предназначена для выделения, подсчета и дифференциации представителей группы колиформных бактерий. Применяется для анализа клинических образцов (фекалии) и проб воды.

Принцип измерения

Основа EMB агара представляет собой модификацию агара Левина без лактозы. Эозин-Y и метиленовый синий делают среду слабоселективной, подавляя рост некоторых грамположительных бактерий, и служат дифференциальными индикаторами.

При падении pH колиформы поглощают комплекс красителей метиленового синего и эозина, в результате чего образуются пурпурно-черные колонии. Неферментирующие бактерии, вероятно, повышают pH окружающей среды за счет окислительного дезаминирования белка, что приводит к растворению комплекса красителей и образованию бесцветных колоний. Пептон служит источником углерода, азота и других необходимых питательных веществ, а фосфат обеспечивает буферизацию среды.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Добавьте необходимый углевод или другое исследуемое вещество в требуемой концентрации.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут. Избегайте перегрева.
5. Охладите до 45–50 °C и перемешайте среду для окисления метиленового синего (восстановления синего цвета) и суспендирования осадка, который является важной частью среды.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Посев и инкубация

• Тестовый образец можно наносить непосредственно на поверхность среды штрихом.
• Инкубируйте посеянные чашки в защищенном от света месте.
• Для получения изолированных колоний следует соблюдать стандартные процедуры посева.
• Параллельно с EMB агаром рекомендуется использовать неселективную среду.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в чашках Петри.
• Реакция: pH 2,75 % водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч (для грибковых культур — при 25–30 °C в течение 24–48 ч) с добавлением углеводов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C в защищенном от солнечного света месте.
• Меры предосторожности: хранить среду в темноте для предотвращения фотоокисления. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и предупреждения

• Среда предназначена только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Для окончательной идентификации изолированных колоний необходимо проведение подтверждающих тестов.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.
• Утилизация использованных сред должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными регламентами по обращению с инфекционными материалами.