HiMedia M301-100G Основа EMB агара

Основа питательной среды HiMedia M301-100G Основа EMB агара — порошковая основа агара ЭМБ без лактозы для добавления углеводов и других тестируемых веществ. HiMedia M301-100G применяется для дифференциации и изучения энтеробактерий, при хранении требует защиты от света и влаги.

Назначение

Основа EMB-агара предназначена для приготовления базовой питательной среды, в которую добавляют выбранные углеводы и другие тестируемые вещества в требуемой концентрации. Среда используется для дифференциации и изучения различных энтеробактерий.

Продукт предназначен для применения in vitro и только квалифицированным персоналом.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Массовая концентрация при приготовлении раствора: 2,75 % м/об

Принцип действия и интерпретация

Агар ЭМБ по Левину разработан для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации Candida albicans. Среда рекомендуется Американской ассоциацией общественного здравоохранения для обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий.

Основа EMB-агара представляет собой модификацию агара ЭМБ по Левину без лактозы. Отсутствие лактозы позволяет использовать среду как базовый агар с последующим добавлением выбранных углеводов для дифференциации различных энтеробактерий.

Эозин Y и метиленовый синий придают среде слабую селективность и подавляют рост некоторых грамположительных бактерий. Красители обеспечивают дифференциацию ферментирующих и неферментирующих лактозу микроорганизмов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

При снижении pH колиформные бактерии образуют пурпурно-чёрные колонии вследствие поглощения комплекса красителей метиленового синего и эозина. Комплекс красителей абсорбируется колонией. Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина и образованию бесцветных колоний.

• Пептон: источник углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ.
• Эозин Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Фосфат: буферный компонент среды.

Некоторые грамположительные бактерии, включая фекальные стрептококки, и дрожжи могут расти на этой среде с образованием точечных колоний.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 27,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Добавьте выбранный углевод или другое тестируемое вещество в требуемой концентрации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Не допускайте перегрева.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синего цвета, и суспендирования осадка. Наличие осадка является обязательной частью среды.
8. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Образцы воды.

Отбор и подготовка образцов

Исследуемый образец можно непосредственно штрихом наносить на чашки с приготовленной средой. Для получения изолированных колоний следует соблюдать стандартные процедуры посева.

Инокулированные чашки необходимо инкубировать в защищённом от света месте. Одновременно с агаром ЭМБ следует инокулировать неселективную питательную среду.

Контроль качества

Внешний вид и свойства среды

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель красновато-пурпурного цвета, опалесцирующий, с зеленоватым оттенком; в чашках Петри образуется мелкодисперсный осадок.
• Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 2,75 % м/об при 25 °C.
• pH: 7,10–7,50.
• Реакция среды при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленным углеводом при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Грибковые культуры инкубируют при 25–30 °C в течение 24–48 ч.

• Знак *: соответствующие номера WDCM.
• Знак #: ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

Эффективность среды ожидается при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Защита приготовленной среды: от солнечного света.
• Условия хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• После каждого использования: плотно закрывать контейнер.
• Причина необходимости защиты от влаги: гигроскопичность продукта, способная привести к образованию комков.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Для обеспечения заявленных характеристик рекомендуется использовать продукт в течение установленного срока годности.

Среду следует хранить вдали от света во