Агар МакКонки с сорбитом HiMedia M298-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Агар МакКонки с сорбитом HiMedia M298-500G (уп/500 гр) — порошковый агар для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli. Агар МакКонки с сорбитом применяется для анализа клинических образцов кала, пищевых и молочных продуктов; среда позволяет различать сорбитолферментирующие и неферментирующие колонии, но требует подтверждения биохимическими тестами.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста. В оригинальном описании изделия также указано назначение для выделения и идентификации энтерогеморрагических Escherichia coli.

Тип питательной среды: диагностическая.

Назначение изделия: агар.

Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки с сорбитом основан на рецептуре, описанной Rappaport и Henigh. Среда предназначена для выделения энтеропатогенной Escherichia coli O157:H7, которая ферментирует лактозу, но не ферментирует сорбит, вследствие чего образует бесцветные колонии. Этот микроорганизм является одной из причин геморрагического колита. Escherichia coli O157:H7 — патоген человека, связанный с геморрагическим колитом, который развивается под действием шигаподобного токсина (SLT).

На стандартном агаре МакКонки с лактозой этот штамм невозможно отличить от других лактозоферментирующих штаммов Escherichia coli. В основе агара МакКонки с сорбитом лактоза заменена сорбитом. В отличие от большинства штаммов Escherichia coli, Escherichia coli O157:H7 ферментирует сорбит медленно или не ферментирует его. При росте Escherichia coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитом формируются бесцветные колонии, тогда как большинство представителей фекальной микрофлоры ферментируют сорбит и образуют розовые колонии. Поэтому агар МакКонки с сорбитом позволяет распознавать Escherichia coli O157:H7.

Функции компонентов среды:

• Пептон и протеозопептон поставляют необходимые для роста микроорганизмов питательные вещества: азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, минеральные вещества, витамины и микроингредиенты.
• Кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей подавляют рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Нейтральный красный является индикатором.
• D-сорбит является ферментируемым углеводом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 50,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Агар МакКонки с сорбитом не следует использовать как единственный метод выявления патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, поскольку некоторые нетоксигенные штаммы также не ферментируют сорбит.
2. Для окончательного подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,0 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,90–7,30.
• Номинальный pH: 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительное техническое отличие

В отличие от стандартного агара МакКонки, содержащего лактозу, агар МакКонки с сорбитом использует сорбит в качестве ферментируемого углевода, благодаря чему Escherichia coli O157:H7 обычно формирует бесцветные колонии, а большинство сорбитферментирующих представителей фекальной микрофлоры — розовые.