HiMedia M298-100G Агар МакКонки с сорбитолом

Питательная среда HiMedia M298-100G Агар МакКонки с сорбитолом — порошковая среда для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, включая серотип O157:H7. Применяется для анализа клинических образцов кала, пищевых и молочных продуктов; для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста. Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы — кал;
• пищевые образцы;
• молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки с сорбитолом основан на составе среды, описанном Раппапортом и Хенигом. Среда предназначена для выделения энтеропатогенной Escherichia coli O157:H7, которая ферментирует лактозу, но не ферментирует сорбитол, вследствие чего образует бесцветные колонии. Escherichia coli O157:H7 признана возбудителем геморрагического колита.

Escherichia coli O157:H7 является патогенным для человека микроорганизмом, связанным с геморрагическим колитом, развитие которого обусловлено действием шигоподобного токсина (SLT).

На стандартном агаре МакКонки с лактозой этот штамм невозможно отличить от других лактозоферментирующих штаммов Escherichia coli. В основе агара МакКонки с сорбитолом лактоза заменена сорбитолом. В отличие от большинства штаммов Escherichia coli, Escherichia coli O157:H7 ферментирует сорбитол медленно либо не ферментирует его вообще.

При росте Escherichia coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитолом формируются бесцветные колонии, тогда как большинство представителей фекальной микрофлоры ферментируют сорбитол и образуют розовые колонии. Поэтому агар МакКонки с сорбитолом позволяет распознавать Escherichia coli O157:H7 по цвету колоний.

Функции компонентов среды:

• пептон и протеозопептон обеспечивают необходимые для роста микроорганизмов азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, минеральные вещества, витамины и микроингредиенты;
• кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей подавляют рост грамположительных бактерий;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• нейтральный красный является индикатором;
• D-сорбитол служит ферментируемым углеводом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 50,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,0%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов применяйте надлежащие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов используйте надлежащие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Агар МакКонки с сорбитолом не следует использовать как единственный метод выявления патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, поскольку некоторые нетоксигенные штаммы также не ферментируют сорбитол.
2. Для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия необходимо хранить продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.