HiMedia M291-100G Агар Шедлера

Питательная агаровая среда HiMedia M291-100G Агар Шедлера в порошке массой 100 г. Среда предназначена для количественного определения аэробных и анаэробных бактерий желудочно-кишечного тракта и хранится при температуре 10–30 °C.

Назначение

Агар Шедлера предназначен для количественного определения различных аэробных и анаэробных видов бактерий, присутствующих в желудочно-кишечном тракте.

Тип образца: клинические образцы — материал из половых органов, мазок из верхних дыхательных путей.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик среды.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M291-100G
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80
• Температура хранения нераскрытого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 43,41 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию до кипения при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы.
6. Перед разливом тщательно перемешайте среду.
7. Не допускайте перегрева и фотоокисления среды, поскольку это замедляет рост бактерий.

Приготовление селективных вариантов среды

Для приготовления агара Шедлера CNA при необходимости асептически добавьте к 1000 мл агара Шедлера восстановленное содержимое по одному флакону витаминной добавки K1 (FD114) и добавки CNA (FD115).

Для приготовления агара Шедлера KV асептически добавьте к 1000 мл агара Шедлера восстановленное содержимое по одному флакону витаминной добавки K1 (FD114) и добавки KV (FD116).

Принцип действия и интерпретация

Агар Шедлера первоначально разработан Schaedler и соавторами, а позднее модифицирован Mata и соавторами с изменением состава для культивирования и количественного определения аэробных и анаэробных микроорганизмов.

Агар Шедлера с добавлением витамина K1 и 5 % крови овцы применяют для выделения требовательных к условиям культивирования анаэробных бактерий, включая Bacteroides.

Добавление колистина и налидиксовой кислоты в состав агара Шедлера CNA вместе с 5 % крови овцы используют для селективного выделения анаэробных грамположительных кокков, включая виды Peptococcus и Peptostreptococcus.

Добавление канамицина и ванкомицина в состав агара Шедлера KV вместе с 5 % крови овцы используют для селективного выделения грамотрицательных анаэробов.

Агар Шедлера служит базовой средой, в которую можно добавлять кровь или другие обогащающие компоненты для повышения выделения требовательных к условиям культивирования анаэробных микроорганизмов.

Триптон, протеозо-пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и L-цистин обеспечивают среду азотистыми факторами роста, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Декстроза служит источником энергии. Гемин и кровь овцы стимулируют рост требовательных микроорганизмов, других видов Bacteroides и грамположительных спорообразующих бактерий.

При использовании среды для посева крови рекомендуется добавлять полянетолсульфонат натрия (SPS). SPS ингибирует фагоцитоз и нейтрализует антибактериальную активность компонентов свежей крови.

Витамин K1 обеспечивает культивирование Bacteroides melaninogenicus, а также стимулирует рост других видов Bacteroides и грамположительных спорообразующих бактерий.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Продукт предназначен для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различающиеся характеры роста на данной среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователю рекомендуется валидировать среду для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, с учётом собственных требований.
3. Для полной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.
4. Гемин и кровь овцы стимулируют рост требовательных микроорганизмов, других видов Bacteroides и грамположительных спорообразующих бактерий.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,34 % при 25 °C; pH 7,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч в анаэробных условиях.