Основа бульона с бромкрезоловым пурпурным HiMedia M284-500G (уп/500 гр)

Диагностическая дифференциальная питательная среда «Основа бульона с бромкрезоловым пурпурным HiMedia M284-500G (уп/500 гр)» — порошковая основа с конечным pH 6,8 ± 0,2. Применяется для приготовления углеводных сред и изучения ферментации углеводов при идентификации чистых культур энтеробактерий и других микроорганизмов; инкубация проводится при 35 ± 2 °C в течение 24–72 ч, при необходимости — до 30 суток.

Назначение и область применения

Основа бульона с бромкрезоловым пурпурным предназначена для приготовления сред с углеводами, используемых в исследованиях ферментации при дифференциации и культуральной идентификации чистых культур энтеробактерий и других микроорганизмов, в особенности грамотрицательных кишечных бактерий.

• Тип питательной среды: диагностическая, дифференциальная
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров работы среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Ферментация углеводов основана на действии микроорганизма на углеводный субстрат, в результате чего происходит подкисление среды. Подкисление выявляется с помощью индикаторного красителя pH — бромкрезолового пурпурного.

Различия в используемых микроорганизмами углеводах, а также в типах и количествах образуемых кислот позволяют дифференцировать бактерии. Различия в ферментативной активности являются одним из важных признаков при дифференциации видов бактерий.

Специальный пептон поставляет растущим микроорганизмам необходимые питательные вещества, прежде всего источники азота. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH и окрашивается в жёлтый цвет при кислой реакции.

Образование газа выявляют по его накоплению в трубке Дюргама. Кислота, образующаяся при ферментации углевода, вызывает изменение окраски бромкрезолового пурпурного на жёлтую. Если углевод не используется и не ферментируется, окраска среды остаётся без изменений либо становится более щелочной — более тёмно-фиолетовой — вследствие декарбоксилирования аминокислот, присутствующих в среде.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 15,02 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 5–10 г исследуемого углевода.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Разлейте среду по пробиркам. При необходимости поместите в пробирки перевёрнутые трубки Дюргама.
5. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Альтернативный способ приготовления:

1. Приготовьте базовую среду, используя 900 мл дистиллированной воды.
2. Отдельно стерилизуйте 100 мл 5–10%-ного раствора требуемого углевода.
3. Добавьте отдельно стерилизованный раствор углевода к приготовленной базовой среде.

Методика проведения ферментационного анализа

1. Инокулируйте бульон чистой культурой, выращенной в течение 18–24 ч.
2. Инкубируйте посевы при 35 ± 2 °C в течение 24–72 ч.
3. Проводите инкубацию в аэробной или анаэробной атмосфере в зависимости от исследуемого микроорганизма.
4. При необходимости продлите инкубацию до 30 суток.
5. Оцените изменение окраски среды и наличие газа в трубке Дюргама.

Для предотвращения возможных реакций реверсии рекомендуется добавлять углевод в концентрации 1 %, за исключением глюкозы (декстрозы). Если среда с углеводом стерилизуется в автоклаве, следует использовать минимально необходимое тепловое воздействие, чтобы избежать гидролиза углевода.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-зелёный однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор фиолетового цвета в пробирках.

Реакция среды

Реакция 1,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 1%-ной декстрозы и без добавления углевода.

Технические характеристики

• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Упаковка: полиэтилен высокой плотности (ПНД, HDPE)
• Масса упаковки: 500 г

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Отличие от аналогичных сред

Среда предназначена для оценки ферментации выбранного углевода с использованием бромкрезолового пурпурного как индикатора pH; при ферментации кислотность повышается и среда окрашивается в жёлтый цвет, а газообразование регистрируется в трубке Дюргама.