HiMedia M281F-500G Фенилаланиновый агар с 1.2% агара

Питательная среда HiMedia M281F-500G Фенилаланиновый агар с 1.2% агара — порошковая среда с содержанием агара 1,2 % и массой упаковки 500 г. Среда предназначена для идентификации видов Yersinia в пищевых образцах по активности фенилаланиндезаминазы; температура хранения составляет 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации видов Yersinia в соответствии с Бактериологическим аналитическим руководством FDA (BAM). Тип образца — пищевые продукты.

Состав

Для приготовления 1 л среды используют:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Способность бактерий превращать фенилаланин в фенилпировиноградную кислоту является важной реакцией для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae. На этом критерии основана фенилаланиновая агаровая среда, разработанная Buttiaux для дифференциации групп Proteus и Providencia от других представителей Enterobacteriaceae.

Фенилаланиновый агар с 1,2 % агара применяется для дифференциации видов Yersinia в соответствии с FDA BAM, 1998. Виды Yersinia дают отрицательную реакцию на фенилаланиндезаминазу.

• Дрожжевой экстракт поддерживает рост микроорганизмов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фенилаланин служит субстратом для ферментов, способных дезаминировать его с образованием фенилпировиноградной кислоты.

При положительной реакции образовавшаяся фенилпировиноградная кислота взаимодействует с солями железа в реактиве с образованием зелёной окраски.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.
5. Охладите среду в пробирках в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Методика проведения анализа

1. Обильно инокулируйте поверхность скошенной части среды.
2. Инкубируйте в течение 12–16 ч.
3. После инкубации добавьте 2–3 капли 10%-ного раствора хлорида железа(III), чтобы раствор полностью покрыл участок роста.
4. Оцените окраску:
   • светло-зелёная или тёмно-зелёная окраска указывает на положительную реакцию;
   • отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.
5. Интерпретируйте результат в течение 5 мин после добавления реактива, поскольку зелёная окраска быстро исчезает.
6. После использования загрязнённые материалы стерилизуйте автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,2 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется гель светло-янтарного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция и pH

Реакция: для 2,4%-ного водного раствора при 25 °C значение pH составляет 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 12–16 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Хранить в плотно закрытом контейнере.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с указаниями на этикетке, а также при использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.