Фенилаланиновый агар HiMedia M281-500G (уп/500 гр)

Питательная дифференциально-диагностическая среда Фенилаланиновый агар HiMedia M281-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления способности микроорганизмов образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина. Среда применяется для дифференциации протеев и провиденций от других представителей семейства Enterobacteriaceae; для подтверждения результата требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Фенилаланиновый агар используется для дифференциации группы Proteus и рода Providencia от других представителей семейства Enterobacteriaceae по способности образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Тип исследуемого материала: выделенные микроорганизмы
• Масса упаковки: 500 гр
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 26,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Принцип действия и интерпретация

Способность видов Proteus превращать фенилаланин в фенилпировиноградную кислоту является важной реакцией для дифференциации Enterobacteriaceae. На основании этого критерия Buttiaux разработал фенилаланиновый агар для дифференциации группы Proteus и Providencia от других представителей Enterobacteriaceae по способности микроорганизмов родов, входящих в группу Proteus, дезаминировать фенилаланин. Фенилаланиновый агар является модификацией среды, первоначально разработанной Ewing и соавторами.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• дрожжевой экстракт поддерживает рост микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• фенилаланин служит субстратом для ферментов, дезаминирующих его с образованием фенилпировиноградной кислоты.

После инкубации фенилпировиноградная кислота реагирует с солями железа в реактиве хлорида железа(III), в результате чего появляется зелёная окраска. Положительная реакция выражается в появлении окраски от светло-зелёной до тёмно-зелёной; при отрицательной реакции цвет не изменяется.

Результат необходимо интерпретировать в течение 5 мин после добавления реактива, поскольку зелёная окраска быстро исчезает.

Методика проведения анализа

1. Обильно инокулируйте поверхность скошенной части питательной среды.
2. Инкубируйте посев в течение 12–16 ч.
3. После инкубации добавьте 0,2 мл 10%-ного раствора хлорида железа(III), распределив раствор по всей поверхности роста.
4. Допускается внесение 0,2 мл, соответствующих 3–5 каплям, 10%-ного водного раствора хлорида железа(III). Также допускается использование 12%-ного водного раствора хлорида железа(III), подкисленного добавлением 2,5 мл концентрированной соляной кислоты на 100 мл реактива.
5. Оцените окраску в течение 5 мин после добавления реактива:
   • появление окраски от светло-зелёной до тёмно-зелёной — положительная реакция на фенилаланиндезаминазу;
   • отсутствие изменения окраски — отрицательная реакция.

Тип образца и обращение с ним

• Тип образца: выделенные микроорганизмы.
• Рекомендуемая техника: обильный посев поверхности скошенной части среды с последующей инкубацией 12–16 ч.
• После завершения работы загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.
• Материалы, контактировавшие с образцами, следует обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 12–16 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее назывался Enterobacter aerogenes.
## Ранее назывался Proteus vulgaris.

Контроль качества

Технические характеристики

Ограничения применения

• Из-за различий в питательных потребностях некоторые микроорганизмы могут расти слабо.
• Для подтверждения результата необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты совместно с исследованием на фенилаланиндезаминазу.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании продукта до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Храните продукт в плотно закрытой упаковке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируем