HiMedia M281-100G Фенилаланиновый агар

Питательная среда HiMedia M281-100G Фенилаланиновый агар — агар для дифференциации бактерий группы Proteus и Providencia по способности образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина. Применяется для анализа изолированных микроорганизмов, при этом для подтверждения результата необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Фенилаланиновый агар рекомендован для дифференциации представителей групп Proteus и Providencia от других энтеробактерий на основании способности образовывать фенилпировиноградную кислоту из фенилаланина.

• Тип образца: изолированные микроорганизмы
• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Способность бактерий рода Proteus превращать фенилаланин в фенилпировиноградную кислоту является важной реакцией для дифференциации энтеробактерий. Фенилаланиновый агар разработан Buttiaux для дифференциации групп Proteus и Providencia от других представителей семейства Enterobacteriaceae по способности микроорганизмов родов группы Proteus дезаминировать фенилаланин. Среда представляет собой модификацию состава, первоначально разработанного Ewing и соавторами.

Функции компонентов среды:

• дрожжевой экстракт поддерживает рост микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• фенилаланин служит субстратом для ферментов, способных дезаминировать его с образованием фенилпировиноградной кислоты.

После инкубации фенилпировиноградная кислота реагирует с солями железа в реактиве, образуя зелёное окрашивание:

• положительная реакция: от светло-зелёного до интенсивно-зелёного окрашивания;
• отрицательная реакция: изменения окраски нет.

Результат необходимо интерпретировать в течение 5 мин после добавления реактива, поскольку зелёное окрашивание быстро исчезает.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте поверхность скошенной части среды большим количеством посевного материала.
2. Инкубируйте посев в течение 12–16 ч.
3. После инкубации добавьте 0,2 мл 10%-ного раствора хлорида железа(III), чтобы раствор полностью покрыл область роста.
4. Оцените окрашивание среды:
   • появление светло-зелёного или тёмно-зелёного цвета означает положительную реакцию на дезаминазу фенилаланина;
   • отсутствие изменения цвета означает отрицательную реакцию.
5. Интерпретируйте результат не позднее чем через 5 мин после добавления реактива.

Для реакции используют один из следующих вариантов реактива:

• 0,2 мл (3–5 капель) 10%-ного водного раствора хлорида железа(III);
• 12%-ный водный раствор хлорида железа(III), подкисленный добавлением 2,5 мл концентрированной соляной кислоты на 100 мл реактива.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Технические характеристики

Контроль качества

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 12–16 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Klebsiella aerogenes ранее классифицировалась как Enterobacter aerogenes.
Proteus hauseri ранее классифицировалась как Proteus vulgaris.

Обращение с образцами и безопасность

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку. Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
• Для подтверждения результата необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты совместно с реакцией на