HiMedia M281-100G Фенилаланиновый агар

Сухая питательная среда HiMedia M281-100G Фенилаланиновый агар для дифференциации микроорганизмов групп Proteus и Providencia. Применяется для отделения данных групп от других представителей семейства Enterobacteriaceae на основании их способности к дезаминированию фенилаланина с образованием фенилпировиновой кислоты.

Принцип измерения

Определение основано на способности видов Proteus превращать фенилаланин в фенилпировиновую кислоту, что является важной реакцией при дифференциации Enterobacteriaceae. Фенилаланин в составе среды служит субстратом для ферментов, способных дезаминировать его. Экстракт дрожжей поддерживает рост микроорганизмов, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

При добавлении водного раствора хлорида железа (III) фенилпировиновая кислота реагирует с солью железа, что приводит к появлению окрашивания от светло-зеленого до темно-зеленого (положительная реакция). Отсутствие изменения цвета свидетельствует об отрицательной реакции.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды:
   • Суспендируйте 26,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
   • Разлейте по пробиркам и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
   • Охладите среду в пробирках в скошенном положении (создавая «скос»).
2. Посев:
   • Нанесите достаточное количество посевной дозы на поверхность скоса.
   • Инкубируйте в течение 12–16 часов при температуре 35–37 °C.
3. Интерпретация результатов:
   • После инкубации добавьте 0,2 мл (3–5 капель) 10 % раствора хлорида железа (III) (или 12 % раствора, подкисленного концентрированной HCl из расчета 2,5 мл на 100 мл реагента), чтобы раствор полностью покрыл рост культуры.
   • Оцените результат в течение 5 минут после добавления реагента, так как зеленый цвет быстро исчезает.
   • Положительная реакция: появление зеленого окрашивания.
   • Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Технические характеристики

Основные параметры

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, слегка опалесцирующий гель (в пробирках-скосах)
• Значение pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2 (диапазон 7,10–7,50)
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Внешний вид порошка: от кремового до желтого однородного свободнотекущего порошка
• Происхождение: без компонентов животного происхождения (микробный)
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 12–16 часов.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами в лабораторных условиях (In Vitro). Ограничения:

• Некоторые организмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом месте, защищенном от перепадов температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

Только для профессионального использования. При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами и культурами.