Основа бульона для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M277-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа бульона для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M277-500G (уп/500 гр)» предназначена для одновременного выявления ферментации маннита и продукции коагулазы при дифференциации стафилококков. Среду применяют с добавлением стерильной кроличьей плазмы для исследования клинических, пищевых и молочных образцов; результат основан на изменении окраски фенолового красного и образовании сгустка коагулированной плазмы.

Назначение

Среда рекомендована для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков.

Среду используют:

• для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов;
• для дифференциации Staphylococcus aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита;
• для одновременного определения ферментации маннита и продукции коагулазы стафилококками.

Тип питательной среды: дифференциальная.

Назначение изделия: основа бульона.

Форма выпуска: порошок, 500 г.

Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Область применения

Тип образца:

• клинические образцы — гной;
• пищевые и молочные образцы.

Для пищевых и молочных образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована с учётом параметров эффективности.

* Эквивалентно настою сердечной мышцы из 375 г.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Непосредственно перед использованием в асептических условиях добавьте 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы для определения коагулазы.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки.

Принцип измерения и интерпретация

Основа бульона для изучения ферментации маннита и коагулазной активности является субстратом для стафилококков и других требовательных к условиям культивирования бактерий. Одновременное выявление продукции коагулазы и ферментации маннита используют для предварительной идентификации патогенных стафилококков.

Продукция коагулазы зависит от наличия сбраживаемого сахара — в данном случае маннита — и белкового фактора, присутствующего в настое HMH и плазме крови.

При ферментации маннита pH среды снижается. Изменение pH выявляется по изменению окраски фенолового красного: индикатор становится жёлтым, и среда приобретает жёлтую окраску.

У коагулазоположительных микроорганизмов в результате роста образуется мутный бульон, обусловленный коагуляцией плазмы и формированием сгустка.

Staphylococcus epidermidis является коагулазонегативным видом, не ферментирующим маннит, поэтому цвет среды не изменяется. Коагулазонегативные виды могут ферментировать маннит и вызывать жёлтое окрашивание, однако помутнение из-за образования сгустка не формируется.

Образование газа определяют помещением небольшой перевёрнутой трубки Дюрхема в пробирку со средой.

Мутантные или старые культуры Staphylococcus aureus могут продуцировать коагулазу слабо. Такие культуры необходимо повторно пересевать на свежую среду и проводить исследование повторно.

Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте среду в количестве 2–5 мл на исследование после добавления приблизительно 12–15 % плазмы.
2. Инокулируйте среду добавлением приблизительно 2 капель исследуемого микроорганизма.
3. Инкубируйте при 37 °C.
4. Проведите первое наблюдение через 2–3 ч инкубации.
5. Проведите дополнительное наблюдение через 4–5 ч инкубации.
6. Параллельно с ферментационными тестами поставьте контрольные пробирки без инокуляции.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: основа
• Форма: порошок
• Масса упаковки: 500 г
• Происхождение компонентов: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• pH 3,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, в пробирках.

Реакция: реакция 3,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики определяют после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной плазмы для определения коагулазы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Упаковка при хранении: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от резких перепадов температуры и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо гермет