Основа бульона для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M277-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная основа бульона для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M277-500G (уп/500 г). Применяется для одновременного определения продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации видов Staphylococcus; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Основа бульона Coagulase Mannitol Broth Base предназначена для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и его дифференциации от других видов стафилококков. Принцип работы основан на одновременном выявлении способности микроорганизмов ферментировать маннит и вырабатывать коагулазу.

Ферментация маннита приводит к снижению pH среды, что фиксируется изменением цвета индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Продукция коагулазы, зависящая от наличия ферментируемого сахара (маннита) и белкового фактора (в составе настоя сердечной мышцы и плазмы крови), вызывает коагуляцию плазмы, что проявляется образованием опалесценции или сгустка в бульоне.

Интерпретация результатов

• Staphylococcus aureus: положительная реакция на ферментацию маннита (среда желтеет) и положительная коагулазная активность (образование сгустка).
• Staphylococcus epidermidis: отрицательная реакция на ферментацию маннита (цвет среды не меняется) и отсутствие коагуляции.
• Другие коагулазоотрицательные виды: могут ферментировать маннит (среда желтеет), но сгусток не образуется.
• Escherichia coli: ферментирует маннит и может проявлять слабую коагулазную активность.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Непосредственно перед использованием в среду асептически добавить 7–15 % (об/об) стерильной, предварительно протестированной кроличьей плазмы (коагулазная плазма).
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам.

Процедура тестирования

1. Для анализа использовать среду в объёме 2–5 мл (с содержанием плазмы около 12–15 %).
2. Инокулировать пробу, добавив около 2 капель исследуемого организма.
3. Инкубировать при температуре 37 °C.
4. Оценить результаты через 2–3 часа, а также через 4–5 часов инкубации.
5. Параллельно с опытными пробами необходимо вести стерильный контроль (неинокулированные пробирки).
6. Для определения газообразования в пробирку с бульоном помещают маленькую перевёрнутую трубку Дурхама.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: светло-жёлтый или светло-розовый гомогенный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: красное, прозрачное или слегка опалесцирующее раствор в пробирках
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Дополнительные параметры

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические материалы: гной.
• Пищевые продукты и молочная продукция.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 7–15 % (об/об) стерильной протестированной коагулазной плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Ограничения и предостережения

• Индивидуальные микроорганизмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Только для профессионального использования в диагностике in vitro. При работе использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица).