HiMedia M277-100G Основа бульона с маннитом для коагулазы

Порошковая питательная среда HiMedia M277-100G Основа бульона с маннитом для коагулазы с конечным значением pH 7,4 ± 0,2. HiMedia M277-100G применяется для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннитола при дифференциации стафилококков; хранение продукта требуется при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннитола при дифференциации стафилококков.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Эквивалентно настою сердечной мышцы из:

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Непосредственно перед использованием в асептических условиях добавьте 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы для коагулазного теста.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки.

Принцип действия и интерпретация

Основа бульона с маннитом для коагулазы используется для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации Staphylococcus aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннитола.

Среда одновременно выявляет ферментацию маннитола и продукцию коагулазы стафилококками. Основа бульона с маннитом для коагулазы служит субстратом для стафилококков и других требовательных к условиям культивирования бактерий. Одновременное выявление продукции коагулазы и ферментации маннитола является предварительным признаком присутствия патогенных стафилококков.

Продукция коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара, в данном случае маннитола, а также белкового фактора, присутствующего в настое HMH и плазме крови. При ферментации маннитола значение pH среды снижается. Изменение pH определяется по изменению окраски фенолового красного: среда становится жёлтой. При росте коагулазоположительных микроорганизмов коагулированная плазма образует непрозрачный бульон.

Staphylococcus epidermidis — коагулазоотрицательный вид, не ферментирующий маннитол; цвет среды при его росте не изменяется. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннитол и вызывать жёлтое окрашивание, однако помутнение из-за образования сгустка не формируется.

Газообразование определяют помещением небольшой перевёрнутой трубки Дюрхема в пробирку со средой.

Мутантные или старые культуры Staphylococcus aureus могут слабо продуцировать коагулазу. Такие культуры необходимо заново выделить на свежую пересевную культуру и повторно исследовать. Escherichia coli ферментирует маннитол и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу.

Методика проведения анализа

1. Для тестирования используйте 2–5 мл среды после добавления приблизительно 12–15 % плазмы.
2. Внесите тестируемый микроорганизм, добавив приблизительно 2 капли культуры.
3. Инкубируйте при 37 °C.
4. Проведите первичную оценку через 2–3 ч инкубации.
5. Повторно оцените результат через 4–5 ч инкубации.
6. Параллельно с тестами на ферментацию ведите контрольные пробирки без инокуляции.

Тип образцов

• Клинические образцы: гной.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным методическим рекомендациям.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера изучите маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать на среде различные варианты роста.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований метода.
3. Для подтверждения результата необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий, легко пересыпающийся порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор в пробирках.
• Реакция: реакция 3,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики определяют после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной коагулазной плазмы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса: 100 г.
• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.

Хранение и срок годности

Храните продукт в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.