HiMedia M277-100G Основа бульона с маннитом для коагулазы

Основа бульона с маннитом для коагулазы HiMedia M277-100G предназначена для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков. Среда используется для изоляции Staphylococcus aureus из клинических образцов, проб пищевых продуктов и молочной продукции.

Принцип измерения

Основа бульона с маннитом для коагулазы (Coagulase Mannitol Broth Base) позволяет одновременно определить способность стафилококков ферментировать маннит и вырабатывать коагулазу.

Процесс идентификации основан на следующих реакциях:

• Ферментация маннита: при расщеплении маннита pH среды снижается, что приводит к изменению цвета индикатора фенолового красного с красного на желтый.
• Коагулазная активность: в присутствии белкового фактора (из инфузии сердечной мышцы и крови кролика) коагулаза-положительные организмы вызывают свертывание плазмы, что приводит к образованию опалесценции или сгустка в бульоне.

Staphylococcus epidermidis (коагулаза-отрицательный и неферментирующий маннит вид) не изменяет цвет среды. Коагулаза-отрицательные виды могут ферментировать маннит (желтый цвет), но не вызывают образования сгустка. Escherichia coli ферментирует маннит и может проявлять слабую коагулазную активность.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Непосредственно перед использованием асептически добавить 7–15 % (об/об) стерильной предварительно протестированной плазмы кролика (коагулазная плазма).
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам.

Процедура тестирования

1. Для анализа использовать среду в объеме 2–5 мл (после добавления 12–15 % плазмы).
2. Инокулировать пробу, добавив около 2 капель исследуемого организма.
3. Инкубировать при температуре 37 °C.
4. Оценить результат через 2–3 часа, а также через 4–5 часов инкубации.
5. Параллельно с тестами на ферментацию необходимо использовать неинокулированные контрольные пробирки.
6. Для определения продукции газа в пробирку со средой следует поместить маленькую перевернутую трубку Дюрхама.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор
• pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2 (диапазон 7,20–7,60)
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное

Состав (г/л)

Контроль качества и культурные характеристики

Характеристики определены при использовании среды с добавлением 7–15 % (об/об) стерильной протестированной коагулазной плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Клинические образцы: гной.
• Пищевые и молочные продукты.

Ограничения

• Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для специфических микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Для окончательного подтверждения необходимо проводить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными правилами по обращению с инфекционными материалами.