Основа среды для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M272-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда «Основа среды для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M272-500G (уп/500 гр)» предназначена для изучения ферментации маннита и коагулазной активности. Основа используется с добавлением стерильной кроличьей плазмы для первичного выделения и идентификации патогенных стафилококков из клинических образцов или классификации чистых культур.

Назначение

Основа среды предназначена для первичного выделения и идентификации патогенных стафилококков из клинических образцов, а также для дифференциации чистых культур.

Среду применяют с добавлением плазмы для дифференциации Staphylococcus spp. по продукции коагулазы и ферментации маннита. Изделие представляет собой основу дифференциальной питательной среды; сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

* Настой HI эквивалентен сухому веществу настоя говяжьего сердца.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. Добавьте в базовую среду 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Режим стерилизации соответствует давлению 12–15 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно 0,083–0,103 МПа.

Принцип действия и интерпретация

Род Staphylococcus включает 28 принятых или предложенных видов, 14 из которых могут встречаться в клинических образцах человека. Стафилококки обычно обнаруживаются на коже и слизистых оболочках человека и животных.

Некоторые патогенные стафилококки человека и животных вырабатывают фермент коагулазу. Обнаружение коагулазы используется в лаборатории для идентификации таких микроорганизмов.

Среда предназначена для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации S. aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита. Среда основана на рецептуре Esber и Faulconer. Ранее Chapman разработал среду для селективного выделения и дифференциации стафилококков. Теллурит-глициновые среды были разработаны Zebovitz и соавторами, а также Marwin для селективного выделения коагулазоположительных видов стафилококков.

Мутантные или старые культуры S. aureus могут слабо продуцировать коагулазу. В таких случаях культуру необходимо повторно пересадить на свежую среду и провести повторную проверку.

Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу. Продукция коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара, в данном случае маннита, а также белкового фактора, присутствующего в настое HI и плазме.

При ферментации маннита pH среды вокруг коагулазоположительных колоний снижается. Изменение pH определяется по смене окраски индикатора бромкрезолового пурпурного: среда приобретает жёлтую окраску, вокруг колоний образуются жёлтые зоны.

Вокруг колоний коагулазоположительных микроорганизмов формируется непрозрачная зона свернувшейся плазмы. Staphylococcus epidermidis является коагулазоотрицательным видом, не ферментирует маннит и не изменяет цвет среды. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннит и образовывать жёлтую зону вокруг колоний, однако непрозрачная зона не формируется.

Тип образцов

Клинические образцы:

• кожа;
• слизистые оболочки.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими рекомендациями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут давать слабую или отрицательную реакцию на коагулазу. При сомнительном результате культуру необходимо исследовать повторно.
2. Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабоположительную реакцию на коагулазу.
3. Окраска по Граму может помочь при дифференциации видов.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,45%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель пурпурного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,7 % при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики: определяются после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Из-за гигроскопичности порошка нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры.