Основа среды для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M272-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная основа среды для изучения ферментации маннита и коагулазной активности HiMedia M272-500G (уп/500 г). Рекомендуется для первичного выделения и идентификации патогенных стафилококков из клинических образцов или для классификации чистых культур.

Область применения

Среда с добавкой плазмы используется для выделения Staphylococcus aureus из клинического материала (образцы с кожи и слизистых оболочек) и дифференциации S. aureus от других видов на основании способности к ферментации маннита и выработке коагулазы.

Принцип измерения и интерпретация

Метод основан на способности стафилококков вырабатывать фермент коагулазу и ферментировать маннит.

1. Ферментация маннита: При расщеплении маннита pH среды вокруг колоний коагулазоположительных микроорганизмов снижается. Это фиксируется индикатором бромкрезоловым пурпурным, который меняет цвет с пурпурного на жёлтый, образуя жёлтые зоны вокруг колоний.
2. Коагулазная активность: Вокруг колоний коагулазоположительных организмов формируется непрозрачная зона коагулированной плазмы.

Интерпретация результатов:

• Staphylococcus aureus: положительная реакция на ферментацию маннита (жёлтый цвет) и положительная коагулазная активность (непрозрачная зона).
• Staphylococcus epidermidis: коагулазоотрицательный вид, не ферментирует маннит (цвет среды не меняется).
• Другие коагулазоотрицательные виды: могут ферментировать маннит (жёлтая зона), но непрозрачная зона коагуляции не образуется.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2

Методика приготовления и использования

1. Растворите 47,02 г основы среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C в течение 15 минут (давление ≈ 0,08–0,1 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 7–15 % (v/v) стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы в базовую среду.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,45 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный, слегка опалесцирующий гель.
• pH (4,7 % водного раствора при 25 °C): 7,20–7,60 (номинал 7,4 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 7–15 % (v/v) стерильной кроличьей плазмы, инкубация при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения применения

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут проявлять слабую или отрицательную коагулазную реакцию; в таких случаях требуется повторное тестирование свежих субкультур.
2. Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабую положительную реакцию на коагулазу.
3. Для дифференциации видов рекомендуется дополнительное окрашивание по Грамму.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат обязательному обеззараживанию путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.