HiMedia M272-100G Основа агара с маннитом для коагулазы

Основа агара с маннитом для коагулазы HiMedia M272-100G предназначена для первичной изоляции и идентификации патогенных стафилококков из клинического материала. Среда используется для дифференциации Staphylococcus aureus от других видов на основе способности к ферментации маннита и выработке коагулазы.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на рецептуре Эсбера и Фолконера. В её состав входит маннит и индикатор бромкрезоловый пурпурный. Патогенные стафилококки, в частности S. aureus, вырабатывают фермент коагулазу и способны ферментировать маннит.

При ферментации маннита pH среды вокруг колоний снижается, что вызывает изменение цвета индикатора с пурпурного на жёлтый. Одновременно с этим вокруг колоний коагулаза-положительных организмов формируется непрозрачная зона коагулированной плазмы.

Интерпретация результатов:

• Staphylococcus aureus: рост колоний, сопровождающийся пожелтением среды (ферментация маннита) и образованием непрозрачной зоны (продукция коагулазы).
• Staphylococcus epidermidis: коагулаза-отрицательный и неферментирующий маннит вид; цвет среды не меняется, непрозрачная зона не образуется.
• Коагулаза-отрицательные виды, ферментирующие маннит: вокруг колоний образуется жёлтая зона, но непрозрачная зона коагуляции отсутствует.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C в течение 15 минут (давление $\approx$ 0,08–0,1 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте в базальную среду 7–15 % (об/об) стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Область применения

Применяется для анализа клинических образцов, взятых с кожи и слизистых оболочек. Используется для классификации чистых культур и первичного выделения стафилококков.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2.

Дополнительные параметры

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 7–15 % (об/об) стерильной кроличьей плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения применения

• Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут проявлять слабую или отрицательную коагулазную реакцию; в таких случаях требуется повторное тестирование свежих субкультур.
• Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабую положительную реакцию на коагулазу.
• Для дифференциации видов рекомендуется дополнительное использование метода окрашивания по Граму.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.