HiMedia M272-100G Основа агара с маннитом для коагулазы

Компонент питательной среды HiMedia M272-100G Основа агара с маннитом для коагулазы представляет собой порошковую основу массой 100 г, предназначенную для хранения при 10–30 °C. Применяется для первичного выделения и идентификации патогенных стафилококков из клинических образцов и дифференциации чистых культур; предназначен только для профессионального использования и диагностики in vitro.

Назначение

Основа агара с маннитом для коагулазы HiMedia M272-100G рекомендуется для первичного выделения и идентификации патогенных стафилококков из клинических образцов, а также для классификации чистых культур.

Состав

Количество компонентов приведено на 1 л среды.

• Эквивалент настоя сердца крупного рогатого скота в пересчёте на сухие вещества.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин. Указанный температурный диапазон соответствует давлению 12–15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,083–0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте в базовую среду 7–15 % об./об. стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Род Staphylococcus включает 28 принятых или предлагаемых видов, 14 из которых могут встречаться в клинических образцах человека. Стафилококки обычно обнаруживаются на коже и слизистых оболочках человека и животных.

Некоторые патогенные стафилококки человека и животных вырабатывают фермент коагулазу. Обнаружение коагулазы используется в лаборатории для идентификации таких микроорганизмов.

Среда предназначена для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации S. aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита. Среда основана на рецептуре Esber и Faulconer.

Мутантные или старые культуры S. aureus могут быть слабыми продуцентами коагулазы. Такие культуры следует заново пересевать из свежей субкультуры и повторно исследовать.

Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу. Продукция коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара, в данном случае маннита, а также от присутствия белкового фактора в настое HI и плазме крови.

При ферментации маннита pH среды вокруг колоний, положительных по коагулазе, снижается. Изменение pH определяется по изменению цвета индикатора бромкрезолового пурпурного: индикатор становится жёлтым, вокруг колоний формируются жёлтые зоны.

Вокруг колоний микроорганизмов, положительных по коагулазе, образуется непрозрачная зона свернувшейся плазмы. Staphylococcus epidermidis является коагулазоотрицательным видом, не ферментирует маннит и не изменяет цвет среды. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннит и образовывать жёлтую зону вокруг колоний, однако непрозрачная зона при этом не формируется.

Тип образцов

Клинические образцы кожи и слизистых оболочек.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут давать слабую или отрицательную реакцию на коагулазу. При сомнительном результате культуру следует исследовать повторно.
2. Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабоположительную реакцию на коагулазу.
3. Окраска по Граму может помочь в дифференциации видов.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,45%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель фиолетового цвета, слегка опалесцирующий, образуется в чашках Петри.

Реакция: реакция 4,7%-ного масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики: определяются при добавлении 7–15 % об./об. стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и