Основа бульона для микоплазм с кристаллическим фиолетовым HiMedia M268-500G (уп/500 гр)

Компонент питательной среды «Основа бульона для микоплазм с кристаллическим фиолетовым HiMedia M268-500G (уп/500 гр)» — порошковая основа бульона с кристаллическим фиолетовым для приготовления селективной среды. Предназначена для выделения и культивирования видов Mycoplasma из клинических образцов и смешанных культур; рабочая среда требует добавления сыворотки и селективной добавки.

Назначение

Основа предназначена для выделения и культивирования видов Mycoplasma — микроорганизмов, называемых также плевропневмониеподобными организмами, — из клинических образцов и смешанных культур.

Тип образца: клинические образцы — мазки из носоглотки и ротоглотки.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Состав рассчитан на 1 л:

Эквивалент: настой говяжьего сердца.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 21,0 г основы в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунт-сил на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 2,85 мл 1%-й селективной добавки PTe 1 % Selective Supplement (по 1 мл на флакон) FD052.
6. Добавьте 300 мл лошадиной сыворотки RM1239 или 10 флаконов обогатительной добавки HPYT Enrichment Supplement FD075.
7. Тщательно перемешайте.
8. В асептических условиях разлейте среду в стерильные пробирки.

Вместо лошадиной сыворотки допускается использовать 25 % асцитической жидкости.

Принцип действия и интерпретация

Среды PPLO были описаны Morton, Smith и Leberman и применялись для изучения требований к росту Mycoplasma, а также для идентификации и культивирования этих микроорганизмов.

Для культивирования Mycoplasma компоненты среды и все добавки не должны содержать токсичных веществ даже в следовых количествах. Для хорошего роста многим видам Mycoplasma требуется сыворотка; антибиотик необходим для подавления роста контаминирующих микроорганизмов.

Кристаллический фиолетовый и теллурит калия подавляют рост многих грамотрицательных и грамположительных бактерий.

Большинство видов Mycoplasma являются аэробными или факультативно-анаэробными, однако некоторые виды относятся к микроаэрофилам. Отдельные анаэробные сапрофитные виды Mycoplasma лучше растут при 22–35 °C, тогда как патогенные штаммы растут при 35 °C.

При культивировании на агаризованной среде Mycoplasma проявляют типичную морфологию: формируют колонии ниже поверхности агара и не растут без сыворотки. После пересевания на чашки с агаром PPLO возможные культуры из бульона образуют колонии с характерной морфологией, напоминающей «жареное яйцо».

Пробирки или чашки следует инкубировать в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа. Результаты оценивают после 48 ч инкубации, однако отрицательные образцы нельзя считать окончательно отрицательными и утилизировать ранее чем через 3 недели инкубации.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 10 % углекислого газа с добавлением 1%-й селективной добавки PTe (по 1 мл на флакон) FD052, 1 % лошадиной сыворотки RM1239 и обогатительной добавки HPYT FD075 после инкубации при 22–35 °C в течение 48 ч.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Виды Mycoplasma являются аэробными или факультативно-анаэробными, а некоторые относятся к микроаэрофилам, поэтому для оптимального выделения необходимо обеспечить соответствующие условия инкубации.
2. Среда имеет высокую степень обогащения; при приготовлении и инокуляции необходимо принимать меры для предотвращения контаминации.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор жёлтого цвета, может иметь фиолетовый оттенок; в пробирках — прозрачный.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,1 % масс./об. при 25 °C; pH 7,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,60–8,00.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Фасовка: 500 г
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• pH водного раствора концентрацией 2,1 % масс./об.: 7,60–8,00
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Хранить в плотно закрытом контейнере.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Утилизируйте инфекционные материалы в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать согласно действующим лабораторным методикам.