Основа бульона для микоплазм с кристаллическим фиолетовым HiMedia M268-500G (уп/500 гр)

Основа бульона для микоплазм с кристаллическим фиолетовым HiMedia M268-500G (уп/500 гр) предназначена для изоляции и культивирования видов Mycoplasma (организмов, подобных плевропневмонии) из клинических образцов и смешанных культур. Среда содержит кристаллический фиолетовый для подавления роста большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Среда PPLO (Pleuropneumonia-like organisms) разработана для обеспечения специфических требований к росту микоплазм. Для успешного культивирования все компоненты и добавки должны быть свободны от токсических веществ даже в малых концентрациях.

Основные особенности:

• Селективность: кристаллический фиолетовый и теллурит калия подавляют рост сопутствующей бактериальной флоры.
• Стимуляция роста: многие виды Mycoplasma требуют наличия сыворотки для активного роста.
• Аэрация: большинство видов являются аэробными или факультативно-анаэробными, некоторые — микроаэрофильными. Сапрофитные формы лучше растут при 22–35 °C, патогенные штаммы — при 35 °C.
• Морфология: при пересеве на агар PPLO культуры из бульона образуют колонии с типичным видом «яичницы» (fried egg appearance).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте следующие компоненты:
   • 2,85 мл селективной добавки PTe 1% (по 1 мл на флакон) (FD052);
   • 300 мл сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов обогащающей добавки HPYT (FD075). Примечание: вместо сыворотки лошади можно использовать 25 % асцитической жидкости.
6. Тщательно перемешайте и асептически разлейте по стерильным пробиркам.

Процедура анализа и инкубация

• Тип образца: клинические образцы (мазки из носоглотки и ротоглотки).
• Условия: инкубация в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
• Сроки: первичный осмотр через 48 часов инкубации. Культуру нельзя считать отрицательной до истечения 3 недель инкубации.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00

Дополнительные параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор в пробирках желтого цвета, возможен фиолетовый оттенок.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались в присутствии 10 % CO₂ с добавлением селективной добавки PTe 1% (FD052), 1 % сыворотки лошади (RM1239) и обогащающей добавки HPYT (FD075) после инкубации при 22–35 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: из-за различной потребности видов Mycoplasma в кислороде (от аэробных до микроаэрофильных) необходимо строго соблюдать режим инкубации для оптимального восстановления культур.
• Риски: среда является высокообогащенной, что требует особой осторожности при приготовлении и инокуляции для предотвращения контаминации.
• Безопасность: только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с клиническими образцами использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) и соблюдать стандартные микробиологические правила.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.