Основа бульона для микоплазм без кристаллвиолета HiMedia M267-500G (уп/500 гр)

Элективная сухая среда Основа бульона для микоплазм без кристаллвиолета HiMedia M267-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Применяется для выделения и культивирования видов Mycoplasma (организмов, подобных плевропневмонии); сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения

Среда PPLO (бульон для микоплазм) без кристаллвиолета приготовлена по формуле Мортона и Лекке. Кристаллвиолет исключен из состава из-за его ингибирующего действия на некоторые виды Mycoplasma. Среда используется для культивирования микоплазм в исследовательских целях. Для обеспечения роста микоплазм компоненты среды и все добавки должны быть свободны от токсических веществ даже в малых количествах. Большинству видов Mycoplasma для роста необходима сыворотка, а также присутствие антибиотиков для подавления сопутствующей микрофлоры.

Область применения

Среда предназначена для работы с клиническими образцами, в частности, с мазками из носоглотки и ротоглотки.

Особенности роста микроорганизмов

• Виды Mycoplasma преимущественно аэробны или факультативно анаэробны, однако некоторые являются микроаэрофильными.
• Анаэробные сапрофитные микоплазмы лучше растут при температуре 22–35 °C.
• Патогенные штаммы растут при температуре 35 °C.

Методика приготовления и анализа

1. Растворить 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть для полного растворения.
2. Стерилизовать в автоклаве при давлении ≈0,07 МПа (15 фунтов) и температуре 121 °C в течение 15 минут.
3. Охладить до 45–50 °C и асептически добавить 300 мл лошадиной сыворотки |RM1239:Horse Serum|.
   • Примечание 1: Если в качестве селективного агента используется кристаллвиолет, вместо лошадиной сыворотки следует добавить асцитную жидкость.
   • Примечание 2: По желанию вместо лошадиной сыворотки можно добавить 10 флаконов селективной добавки HPYT |FD075:Mycoplasma Enrichment Supplement|.
4. Тщательно перемешать и асептически разлить по стерильным пробиркам.

Инкубация и интерпретация

Пробирки следует инкубировать в атмосфере, содержащей 5–10 % CO₂, и проверять через 48 часов. Образцы не следует считать отрицательными до истечения 3 недель инкубации. После пересева на plates PPLO-агара возможные культуры из бульона образуют колонии с типичной морфологией («вид жареного яйца»).

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор желтого цвета в пробирках.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в присутствии 10 % CO₂ с добавлением 1 % лошадиной сыворотки |RM1239:Horse Serum| и добавки HPYT |FD075:Mycoplasma Enrichment Supplement| после инкубации при 22–35 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Требуется строгое соблюдение условий инкубации (температура и состав газовой смеси) для оптимального восстановления микроорганизмов.
• Ввиду высокой степени обогащения среды необходимо соблюдать особую осторожность при приготовлении и инокуляции для предотвращения контаминации.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляются:

• |RM1239:Horse Serum| Лошадиная сыворотка
• |FD075:Mycoplasma Enrichment Supplement| Селективная добавка для выделения микоплазм