Основа агара для микоплазм HiMedia M266-500G (уп/500 гр)

Элективная основа агара для микоплазм HiMedia M266-500G (уп/500 г) предназначена для выделения и культивирования видов Mycoplasma (PPLO). Среда используется с добавлением обогащающих компонентов для роста плевропневмоподобных организмов; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения

Среда PPLO агар обеспечивает необходимые условия для роста микоплазм, которые характеризуются отсутствием клеточной стенки и строгой потребностью в специфических питательных веществах. Инфузия HM B и пептон служат источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Для оптимального роста большинству видов Mycoplasma необходима сыворотка и антибиотики (для подавления контаминации). Микоплазмы в агаре формируют характерные колонии под поверхностью среды, напоминающие «глазунью» (fried egg): плотный центр и менее плотная периферия с вакуолями. Диаметр колоний варьируется от 10 до 500 мкм (0,01–0,5 мм).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 300 мл лошадиной сыворотки (RM1239) или 10 флаконов селективной добавки HPYT (FD075). В качестве альтернативы лошадиной сыворотке можно использовать 25 % асцитную жидкость.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Инкубация и интерпретация

• Условия: Инкубируйте чашки или пробирки в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
• Температурный режим: Патогенные штаммы растут при 35 °C; некоторые анаэробные сапрофитные микоплазмы растут лучше при 22–35 °C.
• Сроки: Осмотр через 48 часов инкубации. Результат считается отрицательным только после 3 недель инкубации.

Область применения

• Клинические образцы: образцы мочи, мазки из уретры, образцы мокроты.
• Фармацевтический контроль: анализ проб согласно отраслевым руководствам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,8 $\pm$ 0,2 для 3,6 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при наличии 10 % CO₂ с добавлением 1 % лошадиной сыворотки (RM1239) или 10 флаконов добавки HPYT (FD075) после инкубации при 22–35 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию.

Ограничения применения

1. Для оптимального восстановления микроорганизмов необходимо строго соблюдать условия инкубации (учитывая микроаэрофильный характер некоторых видов).
2. Требуется точное поддержание температуры (22–35 °C для сапрофитов, 35 °C для патогенов).
3. Из-за высокой степени обогащения среды при инокуляции следует соблюдать особую осторожность для предотвращения контаминации.

Комплект поставки и совместимость

Основа агара поставляется в упаковке 500 г. Для полноценного использования среды требуются следующие добавки (поставляются по заявке):

• RM1239 Лошадиная сыворотка
• FD075 Селективная добавка для выделения микоплазм (Mycoplasma Enrichment Supplement)