HiMedia M266-100G Основа PPLO агара

Основа PPLO агара HiMedia M266-100G (производство HiMedia) предназначена для изоляции и культивирования видов Mycoplasma (плевропневмоподобных организмов — PPLO). Среда используется при добавлении обогатителей для работы с клиническими и фармацевтическими образцами; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда PPLO агар разработана для обеспечения специфических требований к росту микоплазм. Компоненты среды и все добавки должны быть полностью очищены от токсичных веществ даже в малых концентрациях.

• Питательная основа: Инфузия HM B и пептон служат источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых нутриентов.
• Осмотический баланс: Поддерживается за счет добавления хлорида натрия.
• Специфика роста: Большинству видов Mycoplasma для полноценного роста необходима сыворотка и присутствие антибиотиков (для подавления контаминантов).
• Метаболизм: Виды Mycoplasma преимущественно аэробны или факультативно анаэробны, некоторые являются микроаэрофильными. Сапрофитные анаэробные формы лучше растут при 22–35 °C, патогенные штаммы — при 35 °C.

При росте на агаре колонии микоплазм имеют типичную морфологию «яичницы-глазуньи» (round with a dense center and a less dense periphery) с плотным центром и менее плотной периферией, где видны характерные крупные вакуоли. Диаметр колоний варьируется от 10 до 500 мкм (0,01–0,5 мм), они проникают внутрь среды и не растут без добавления сыворотки.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 300 мл сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов добавки HPYT (FD075). В качестве альтернативы сыворотке лошади можно использовать 25 % асцитную жидкость.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Инкубация и анализ

• Условия: Инкубируйте чашки или пробирки в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа (CO₂).
• Сроки: Первичный осмотр проводится через 48 часов. Образцы не следует считать отрицательными до истечения 3 недель инкубации.

Область применения

• Клинические образцы: пробы мочи, мазки из уретры, образцы мокроты.
• Фармацевтический контроль: анализ образцов на соответствие требованиям чистоты.

Технические характеристики

Основные параметры

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет: от кремового до желтого, однородный свободнотекучий порошок
• Конечный pH (при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель

Состав, г/л:

Дополнительные спецификации

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в присутствии 10 % CO₂ с добавлением 1 % сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов добавки HPYT (FD075) после инкубации при 22–35 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

1. Условия инкубации: Поскольку виды Mycoplasma могут быть микроаэрофильными, для оптимального восстановления необходимо строгое соблюдение режима инкубации.
2. Температурный режим: Сапрофитные формы растут при 22–35 °C, патогенные — при 35 °C.
3. Риск контаминации: В связи с высокой степенью обогащения среды при инокуляции следует соблюдать особую осторожность.
4. Безопасность: Только для профессионального использования (In Vitro диагностика). Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.