Питательная среда HiMedia M255-100G Основа бульона с солодовым экстрактом — порошкообразная основа для приготовления культуральной среды с конечным pH 5,4 ± 0,2. Применяется для обнаружения, выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов; хранится при 10–30 °C.

Назначение

Основа бульона с солодовым экстрактом предназначена для обнаружения, выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов. Среда используется для поддержания, выделения и идентификации грибов, а также для сравнительных морфологических исследований.

Среда на основе солодового экстракта рекомендована для исследования дрожжей и плесневых грибов в Бактериологическом аналитическом руководстве Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США. Среда также предложена в нескольких фармакопеях для контроля стерильности фармацевтической продукции.

Состав

Состав на 1 л готовой среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Конечный pH при 25 °C: 5,4 ± 0,2.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 20,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Оставьте суспензию для пропитывания на 15 мин.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 10 мин.
4. Давление, соответствующее указанному режиму стерилизации: 10 фунтов давления, приблизительно 0,069 МПа.
5. Тщательно перемешайте приготовленную среду.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в требуемом объёме.
7. Не допускайте перегрева среды.
8. При необходимости корректировки в сторону более кислого pH добавьте 10%-ную молочную кислоту FD095.

Для микологических подсчётов рекомендуется дополнительно подкислять среду добавлением 10%-ной молочной кислоты, чтобы подавить рост бактерий. Для подавления бактериального роста антибиотики можно добавлять в виде стерильных растворов в расплавленную среду непосредственно перед разливом в стерильные пробирки.

Принцип действия и интерпретация

Лабораторная диагностика грибковых инфекций в основном основывается на прямых, а не косвенных методах. Диагноз почти всегда устанавливают по результатам микологического лабораторного исследования. Наряду с выделением микроорганизмов существенное значение имеет прямая микроскопия.

Среды для выделения грибов имеют кислую реакцию и предназначены для ингибирования бактерий. Солод и солодовые экстракты широко применяются для выращивания дрожжей и плесневых грибов. Солодовый экстракт обеспечивает кислую среду и питательные вещества, благоприятные для роста и метаболизма дрожжей и плесневых грибов. Микологический пептон обеспечивает быстрое формирование обильного роста с типичной морфологией и пигментацией.

Солодовый бульон является аналогом среды, разработанной для обнаружения, выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов. Для микологических подсчётов более кислая реакция среды может быть предпочтительной, поскольку она подавляет рост бактерий.

Тип образца

• Клинические образцы: соскобы кожи.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор янтарного цвета в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,0 % масс./об. при 25 °C; pH 5,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,20–5,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

Обозначения:

• соответствующие номера WDCM;

ранее обозначался как Aspergillus niger.

Ограничения применения

1. Из-за различий в потребностях микроорганизмов в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на этой среде.
2. В зависимости от утилизации субстрата микроорганизмом могут наблюдаться небольшие вариации цвета.
3. Для подтверждения необходима дальнейшая биохимическая идентификация микроорганизмов.
4. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать неодинаковые характеры роста на среде.
5. Каждая партия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом собственной задачи.

Требования безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Хранить в плотно закрытом контейнере.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде; бутылку необходимо плотно закрывать, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются на оптимальном уровне при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.