HiMedia M248-100G Основа KF стрептококкового агара

Порошкообразная питательная среда HiMedia M248-100G Основа KF стрептококкового агара с содержанием азида натрия 0,400 г/л. Применяется для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в поверхностной воде прямым посевом или мембранно-фильтрационным методом, а также для исследования клинических и пищевых образцов.

Назначение

Основа KF стрептококкового агара предназначена для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в поверхностной воде прямым посевом или методом мембранной фильтрации. Среда также может применяться для клинических образцов и пищевых продуктов.

Состав

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки представляют собой шаровидные грамположительные бактерии и входят в состав нормальной комменсальной микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки, обнаруживаемые в фекалиях, относятся к фекальным стрептококкам и включают стрептококки с антигенами группы D по классификации Лэнсфилд. К этой группе относятся, в частности, Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, Streptococcus bovis и Streptococcus duran.

Фекальные стрептококки являются патогенами низкой вирулентности и редко вызывают заболевания. Возможные клинические проявления включают инфекции мочевыводящих путей у пациентов с катетером, смешанные инфекции брюшной раны после операций на кишечнике и эндокардит при наличии патологически изменённых клапанов.

Среда Кеннера—фекальная (KF) была разработана Kenner и соавторами для выявления стрептококков в воде и пищевых продуктах. Основа KF стрептококкового агара рекомендуется APHA для количественного определения фекальных стрептококков в пищевых продуктах.

• Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают фекальные стрептококки источниками азота, углерода, серы, аминокислот, витаминов и микроэлементов.
• Лактоза и мальтоза являются сбраживаемыми углеводами и служат источниками энергии.
• Азид натрия действует как селективный агент и подавляет рост грамотрицательных бактерий.
• Хлорид 2,3,5-трифенилтетразолия (TTC) восстанавливается активно метаболизирующими клетками до нерастворимого формазана, в результате чего образуются колонии розового или красного цвета.
• Бактерии, устойчивые к азиду, утилизируют лактозу и/или мальтозу. Образующаяся кислота изменяет цвет индикаторных красителей на жёлтый.
• Бактериальные клетки восстанавливают TTC до нерастворимого формазана, что приводит к образованию колоний от розового до красного цвета.

Образцы можно непосредственно штриховать по поверхности среды. При мембранно-фильтрационном методе стерильные мембранные фильтры, через которые пропущены образцы воды, асептически помещают на питательную среду. После инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч энтерококки образуют колонии от розового до красного цвета. После предварительной идентификации необходимо выполнить дополнительные подтверждающие тесты.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 76,4 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона бромкрезолового пурпурного FD093.
3. Нагрейте среду до кипения, чтобы полностью растворить компоненты.
4. Не автоклавируйте среду.
5. Не допускайте перегрева: перегрев снижает pH и ухудшает рабочие характеристики среды.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Асептически добавьте 10 мл 1%-ного раствора хлорида 2,3,5-трифенилтетразолия (TTC), реагент FD057.
8. Тщательно перемешайте среду.
9. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативами.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики вне организма.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• С питательной средой должны работать только обученные сотрудники.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Из-за различий в потребностях микроорганизмов в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: светло-жёлтая.
• После добавления FD093, бромкрезолового пурпурного: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция 7,64%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленными FD057 и FD093 при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.
• # — ранее использовавшееся название Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение заявленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При у