Основа среды IUT HiMedia M247-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа среды IUT HiMedia M247-500G (уп/500 гр) — химически определённая порошкообразная основа для приготовления среды культивирования микобактерий. Основа среды используется для культивирования Mycobacterium tuberculosis с добавлением глицерина и стерильной эмульсии цельного яйца; готовая среда хранится при 2–8 °C.

Назначение

Основа среды IUT рекомендована для культивирования Mycobacterium tuberculosis из клинических образцов, включая мокроту.

Среда представляет собой вариант среды Лёвенштейна—Йенсена с глицерином, также известный как глицериновая среда Лёвенштейна—Йенсена. В отличие от среды Лёвенштейна—Йенсена, состав не содержит картофельной муки или крахмала.

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Форма выпуска: порошок
• Тип состава: химически определённый
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности

Состав

Количество компонентов указано на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Род Mycobacterium относится к семейству Mycobacteriaceae. Микобактерии являются аэробными, неподвижными, грамположительными и характеризуются кислотоустойчивостью при окрашивании с использованием кислотно-спиртовой обработки.

Рост микобактерий наблюдается при температуре 30–41 °C, оптимальная температура роста составляет 35–37 °C. Первичное выделение микобактерий может быть успешным на различных питательных средах, однако для этой цели рекомендована среда Лёвенштейна—Йенсена с глицерином, то есть среда IUT с глицерином. Среда рекомендована Международным союзом борьбы с туберкулёзом для диагностики микобактериальных инфекций. Среда также широко известна как глицериновая среда Лёвенштейна—Йенсена.

Среда поддерживает быстрый и обильный рост первичных культур. Добавление глицерина улучшает рост M. tuberculosis. Для среды сообщалось о более высокой доле положительных результатов тестирования.

Малахитовый зелёный оказывает ингибирующее действие на рост микроорганизмов, отличных от микобактерий, и создаёт цветовой контраст, облегчающий распознавание колоний, особенно небольших колоний, которые без красителя было бы трудно увидеть.

Среда рекомендована для выделения человеческого типа туберкулёзной палочки, рост которого усиливается в присутствии глицерина. Морфология колоний позволяет дифференцировать человеческий и бычий типы туберкулёзной палочки, однако бычьи микобактерии могут ингибироваться глицерином и поэтому не расти на этой среде.

• L-аспарагин: источник азота для культивирования туберкулёзных палочек.
• Неорганические соли: источник ионов, необходимых для метаболизма микобактерий.
• Малахитовый зелёный: ингибитор роста посторонних микроорганизмов и контрастный краситель.
• Глицерин: компонент, усиливающий рост M. tuberculosis.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 7,3 г порошка в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 1 л стерильной эмульсии цельного яйца, приготовленной в асептических условиях.
6. Тщательно перемешайте, не допуская образования пузырьков воздуха.
7. Разлейте среду в ёмкости с завинчивающимися крышками.
8. Простерилизуйте методом инсписсирования при 85 °C в течение 1 ч.

Образцы и обращение с ними

• Тип образца: клинический образец.
• Рекомендуемый клинический образец: мокрота.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами и действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

При отсутствии надлежащих аэробных условий и повышенного содержания CO₂ во время инкубации возможны ошибочные результаты.

Бычьи микобактерии могут подавляться глицерином и не вырастать на данной среде.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид основы: однородный сыпучий порошок от зеленовато-синего до павлиньего синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда имеет голубовато-зелёный цвет. При смешивании 7,3 г основы с 600 мл дистиллированной воды и 1000 мл эмульсии цельного яйца с последующим инсписсированием среда коагулирует с образованием гладких непрозрачных скосов бледно-синего цвета.

Реакция и pH

• Условия определения реакции: водный раствор 7,3 г основы в 600 мл дистиллированной воды при 25 °C.
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 5–10 % CO₂, после добавления эмульсии цельного яйца и инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения основы: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Требования к месту хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Наилучшие рабочие характеристики обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Меры безопасности

• Только для применения в диагностике in vitro.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила