Основа среды IUT HiMedia M247-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Основа среды IUT HiMedia M247-500G (уп/500 гр) для культивирования Mycobacterium tuberculosis. Применяется для выделения возбудителей туберкулёза из клинического материала (мокроты) с использованием добавок глицерина и эмульсии целого яйца.

Принцип измерения

Среда предназначена для роста бактерий рода Mycobacterium, которые являются аэробными, неподвижными, грамположительными и кислотоустойчивыми палочками. Оптимальная температура роста составляет 35–37 °C (диапазон 30–41 °C).

Основа среды IUT (International Union against Tuberculosis) также известна как глицериновая среда Лёвенштейн-Йенсена. В отличие от классической среды Лёвенштейн-Йенсена, она не содержит картофельной муки или крахмала, что, по имеющимся данным, обеспечивает более высокую долю положительных тестов и способствует быстрому и обильному росту первичных культур.

Основные компоненты и их функции:

• Глицерин: улучшает рост M. tuberculosis.
• Малахитовый зеленый: подавляет рост посторонней микрофлоры (немикобактерий) и создает цветовой контраст, облегчающий визуализацию мелких колоний.
• L-аспарагин: служит источником азота.
• Неорганические соли: обеспечивают метаболические потребности микобактерий.

Среда рекомендована для изоляции туберкулеза человеческого типа. Важно учитывать, что бактерии бычьего типа могут подавляться глицерином и не расти на данной среде.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 7,3 г основы в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 1 литр стерильной эмульсии целого яйца, приготовленной предварительно.
6. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
7. Разлейте в контейнеры с завинчивающимися крышками.
8. Проведите стерилизацию путем инсписсации (нагревание) при 85 °C в течение 1 часа.

Процедура анализа

• Тип образца: клинические образцы (мокрота).
• Инкубация: посев инкубируют при 35–37 °C в течение 2–4 недель.
• Условия: необходимо обеспечить надлежащий аэробный режим и повышенное парциальное давление CO₂ (5–10 %). Несоблюдение этих условий может привести к ошибочным результатам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Общие параметры

• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Внешний вид: однородный свободный порошок от зеленовато-синего до синего цвета («павлиний синий»)
• Цвет и прозрачность готовой среды: после смешивания основы с эмульсией яйца и инсписсации среда коагулирует, образуя матовые гладкие скосы бледно-голубого цвета

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в присутствии 5–10 % углекислого газа (CO₂) с добавлением эмульсии целого яйца после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре от +2 до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Назначение: только для диагностики in vitro.
• Безопасность: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные правила работы с клиническими образцами и микробиологическими культурами.
• Утилизация: все загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.