HiMedia M247-100G Основа IUT среды

Основа питательной среды IUT (M247) производства HiMedia для культивирования Mycobacterium tuberculosis. Рекомендуется Международным союзом по борьбе с туберкулезом для диагностики микобактериальных инфекций; отличается от среды Левенштейна-Йенсена отсутствием картофельного крахмала.

Принцип действия и интерпретация

Среда предназначена для выделения микробактерий рода Mycobacterium (семейство Mycobacteriaceae) — аэробных неподвижных грамположительных кислотоустойчивых палочек. Оптимальный рост наблюдается при температуре 35–37 °C.

Добавление глицерина стимулирует рост M. tuberculosis, что делает данную среду (также известную как глицериновая среда Левенштейна-Йенсена) предпочтительной для первичного выделения культур. Малахитовый зеленый подавляет рост посторонней микрофлоры и создает цветовой контраст, облегчающий визуализацию мелких колоний. L-аспарагин служит источником азота, а неорганические соли обеспечивают метаболизм микобактерий.

Среда рекомендована для изоляции туберкулеза человеческого типа. Морфология колоний позволяет дифференцировать человеческий и бычий типы бацилл; при этом бычьи бациллы могут подавляться глицерином и не расти на данной среде.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и стерилизации

1. Растворить 7,3 г основы в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. При необходимости нагреть до полного растворения.
2. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
3. Охладить до 45–50 °C и в асептических условиях добавить 1 литр стерильной эмульсии цельного яйца.
4. Тщательно перемешать, избегая образования пузырьков воздуха, и разлить в контейнеры с завинчивающимися крышками.
5. Стерилизовать методом инсписсации (нагревание) при 85 °C в течение 1 часа.

Область применения и работа с образцами

• Тип образца: клинический материал (мокрота).
• Сбор и обработка: следует использовать стандартные методики работы с биоматериалом согласно установленным руководствам.
• Ограничения: отсутствие надлежащих аэробных условий или недостаточный уровень напряжения CO₂ при инкубации может привести к ошибочным результатам.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от зеленовато-синего до синего цвета («цвет павлина»).
• Цвет и прозрачность готовой среды: базовая среда имеет сине-зеленый цвет. После смешивания с эмульсией яйца и инсписсации образуются опалесцирующие гладкие скосы бледно-голубого цвета.
• Реакция: pH водного раствора (7,3 г на 600 мл воды) при 25 °C составляет 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Наблюдаются при наличии 5–10 % CO₂ после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель (с добавлением эмульсии цельного яйца).

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Назначение: Основа среды

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат стерилизации в автоклаве и/или сжиганию. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы.

Меры предосторожности

Только для диагностики in vitro. При работе использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать правила микробиологической лабораторной практики.