HiMedia M247-100G Основа IUT среды

Основа питательной среды HiMedia M247-100G Основа IUT среды — химически определённый порошковый компонент в упаковке из ПЭВП. Применяется для культивирования Mycobacterium tuberculosis; приготовленная среда требует добавления 1 л стерильной цельной яичной эмульсии и хранения при 2–8 °C.

Назначение

Основа IUT среды рекомендована для культивирования Mycobacterium tuberculosis. Тип образца — клинический материал, в частности мокрота.

Продукт предназначен только для диагностики in vitro.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Род Mycobacterium относится к семейству Mycobacteriaceae. Микобактерии являются аэробными, неподвижными, грамположительными и характеризуются как кислотоустойчивые бациллы.

Рост микобактерий происходит при температуре 30–41 °C, оптимальная температура составляет 35–37 °C. Хотя первичное выделение может быть успешным на различных питательных средах, для этой цели рекомендована среда Лёвенштейна—Йенсена с глицерином, то есть IUT-среда с глицерином.

Среда рекомендована Международным союзом борьбы с туберкулёзом для диагностики микобактериальных инфекций. Также продукт широко известен как глицериновая среда Лёвенштейна—Йенсена. От классической среды Лёвенштейна—Йенсена продукт отличается отсутствием картофельной муки или крахмала.

Среда поддерживает быстрый и обильный рост первичных культур. Добавление глицерина улучшает рост M. tuberculosis.

Малахитовый зелёный оказывает ингибирующее действие на рост организмов, отличных от микобактерий, и создаёт цветовой контраст, облегчающий распознавание колоний, особенно мелких, которые без красителя было бы трудно обнаружить.

Среда рекомендована для выделения человеческого типа туберкулёзной палочки, рост которого усиливается в присутствии глицерина. Морфология колоний позволяет дифференцировать человеческий и бычий типы бацилл. При этом бычьи бациллы могут ингибироваться глицерином и поэтому не расти на этой среде.

L-аспарагин служит источником азота для культивирования туберкулёзных бацилл. Неорганические соли обеспечивают микобактерии необходимыми для метаболизма ионами.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 7,3 г сухой основы в 600 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 psi (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 1 л стерильной цельной яичной эмульсии, приготовленной с соблюдением асептических условий.
6. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
7. Разлейте среду в контейнеры с завинчивающимися крышками.
8. Простерилизуйте среду методом инсписсирования при 85 °C в течение 1 ч.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методики обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Продукт предназначен только для диагностики in vitro.

Ограничения применения

При инкубации необходимо обеспечить надлежащие аэробные условия. Отсутствие повышенного содержания CO₂ в процессе инкубации может привести к ошибочному результату.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Рекомендуемый микроорганизм: Mycobacterium tuberculosis
• Тип образца: клинический материал, мокрота
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 100 г
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от зеленовато-синего до павлинье-синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Основная среда имеет голубовато-зелёный цвет. При смешивании 7,3 г основы с 600 мл дистиллированной воды и 1000 мл цельной яичной эмульсии с последующим инсписсированием среда коагулирует с образованием гладких непрозрачных скосов бледно-голубого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора 7,3 г основы в 600 мл дистиллированной воды при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 5–10 % CO₂ и добавленной цельной яичной эмульсии после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия хранения и срок годности

Храните сухой продукт в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия продукт необходимо хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обезз