Маннит-декстрозный агар HiMedia M241-500G (уп/500 гр)

Маннит-декстрозный агар HiMedia M241-500G (уп/500 гр) — диагностическая агаровая питательная среда для выявления уреазообразования и ферментации декстрозы и маннита. Маннит-декстрозный агар применяют для первичного выделения Salmonella и Shigella из пищевых образцов; среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Маннит-декстрозный агар, также агар Джиллиса № 1, предназначен для:

• выявления продукции уреазы;
• определения ферментации декстрозы;
• определения ферментации маннита;
• первичного выделения видов Salmonella и Shigella из пищевых образцов.

Среда применяется как дифференциальная среда для определения биохимических свойств нелактозоферментирующих колоний до подтверждения серологическим типированием.

Состав

Состав на 1 л:

HM-пептон B эквивалентен мясному экстракту. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 4,6 % масс./об. при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,05 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 15 мин; давление — 10 фунтов/кв. дюйм, ориентировочно 0,069 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 25 мл стерильного 40%-ного раствора мочевины FD048.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду по пробиркам.
8. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной части с удлинённым столбиком.

Принцип измерения и интерпретация

Enterobacteriaceae включают грамотрицательные палочки, широко распространённые в природе. К этой группе относятся такие патогены, как Salmonella, Shigella, Yersinia, диареегенные E.coli и другие микроорганизмы. Эти бактерии вызывают многочисленные заболевания человека и часто выделяются из клинических образцов. Выявление и идентификация бактерий имеют значение для клинических и эпидемиологических исследований. Остальные представители Enterobacteriaceae преимущественно являются комменсалами или сапрофитами.

Агар Джиллиса № 1 представляет собой модификацию среды Кона и предназначен для выявления продукции уреазы, а также ферментации декстрозы и маннита. Среда используется как замена традиционному методу определения биохимической идентичности нелактозоферментирующих колоний перед серологическим типированием.

Ферментация декстрозы определяется по изменению цвета столбика с тёмно-зелёного на жёлтый. Ферментация маннита сопровождается появлением жёлтой окраски скошенной части. Газ, образующийся при ферментации, может проявляться в различной степени: от небольшого расщепления среды вдоль следа инокуляционной петли до разрушения среды. Продукция уреазы вызывает интенсивно-синее окрашивание всей среды.

HM-пептон B, протеозный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками питательных веществ, необходимых для роста бактерий. Дрожжевой экстракт дополнительно обеспечивает поступление витаминов группы B. Декстроза и маннит являются ферментируемыми углеводами; бромтимоловый синий, крезоловый красный и тимоловый синий образуют индикаторную смесь.

Методика посева и анализа

1. Инокулируйте исследуемый образец в предварительную среду обогащения, например в жидкую основу тетратионатного бульона M032.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. Пересевайте обогащённую культуру на дифференциальную среду, например среду Уилсона—Блэра M331 или агар МакКонки M081.
4. Выделите предположительные колонии и очистите их.
5. Используйте чистые культуры для инокуляции пробирок со средой Джиллиса № 1.
6. Инокулируйте среду сначала нанесением материала на скошенную часть, затем проколом до основания столбика.

Тип образца

• Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методики отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,6%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенной среды образуется зелёный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

| Организм | Посевная доза (КОЕ