Основа питательной среды HiMedia M2099-500G Основа HiCrome CarbaResist агара — порошковый хромогенный компонент для дифференциации микроорганизмов. Предназначена для выделения и дифференциации устойчивых к карбапенемам представителей семейства Enterobacteriaceae из клинических образцов; отдельные промежуточные штаммы могут давать слабый рост.

Назначение

HiCrome CarbaResist Agar Base предназначена для выделения и дифференциации устойчивых к карбапенемам представителей семейства Enterobacteriaceae из клинических образцов. Среда используется как скрининговая; выделенные изоляты необходимо дополнительно исследовать на чувствительность к карбапенемам по рекомендациям CLSI.

Состав

Расход основы: 42,50 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Гидролизат казеина кислотой.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

HiCrome CarbaResist Agar Base представляет собой хромогенную среду для обнаружения и дифференциации видов Enterobacteriaceae, продуцирующих карбапенемазы.

Карбапенемы применяются для лечения тяжёлых инвазивных инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями, устойчивыми к лекарственным препаратам. Образование фермента карбапенемазы обусловливает устойчивость к пенициллинам, цефалоспоринам, включая цефепим и цефтриаксон, карбапенемам, включая меропенем и эртапенем, а также азтреонаму. В результате такие возбудители приобретают множественную лекарственную устойчивость.

Большинство бактерий, продуцирующих карбапенемазу, относится к семейству Enterobacteriaceae и обозначается как устойчивые к карбапенемам представители Enterobacteriaceae (CRE). Помимо Enterobacteriaceae, способность продуцировать карбапенемазу выявлена у отдельных редких штаммов Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter baumannii.

Ациказа обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, серой и другими необходимыми питательными веществами. Хромогенная смесь обеспечивает цветовую дифференциацию колоний.

Хромогенные субстраты избирательно расщепляются ферментом β-D-галактозидазой, который продуцируется устойчивыми к колистину клетками E. coli, в результате чего формируются колонии от розового до фиолетового цвета. Устойчивые к колистину клетки K. pneumoniae расщепляют другой хромогенный субстрат с образованием колоний металлически-синего цвета. Виды Pseudomonas образуют бесцветные колонии или колонии со светло-зеленоватым пигментом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,50 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов/кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Carba Selective Supplement (FD357).
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Клинические образцы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, предусмотренные установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Окончательную идентификацию необходимо проводить биохимическими тестами или методом определения антибиотикочувствительности в соответствии с рекомендациями CLSI.
2. Некоторые промежуточные штаммы по чувствительности к карбапенемам могут демонстрировать слабый рост.

Контроль качества

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета, формирующийся в чашках Петри.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,25 % масс./об. при 25 °C.
• pH реакционной среды: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.